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记录表修改版
基因扩增荧光定量检测记录表
实验日期: AB7300保存文件名: 实验员: 审核者:
检测项目:□BCR-ABL210 □BCR-ABL190 □PML-RARA □WT1 □ETO □MLL-AF4 □E2A-PBX1 □CBFβ-MYH11 □JAK-2
使用说明:
严格按单一流向进行实验,即试剂准备区(1区)→样本处理区(2区)→扩增分析区(3区),严禁逆向。本记录表的流向亦遵循此流程;
各项目执行后,把相应项目前的方框用红色标注如:“□”或在方框内打“√”。
实验室内温度为15℃—30℃为合格范围;湿度不高于80%。
实验后对实验室的清洁与消毒方法参见“PCR实验室清洁程序” ,实验后次日关闭通风设备和移动紫外灯;
实验结束后,将标本的检测结果登记至标本记录本上以备查询。保存1年;
AB7300扩增仪结果保存于仪器____D__盘____RH_______文件夹中,并备份于公司优盘中。
前期准备
□试剂在有效期内,厂家:上海源奇
□75%酒精在使用有效期内,厂家:洛阳洁康_ 浓度___75%___。
□次氯酸钠有效期内,厂家:_________,浓度__________。
□无RNA酶加样器吸头 厂家: 超基因 □其他
□耗材及仪器在校准有效期内(校准之日起1年)
操作者:
试剂准备区(1区)
①实验前: □打开通风设备 □75%酒精擦拭实验台面 □__%次氯酸钠
②试剂配置记录:
BCR-ABL210 BCR-ABL190 ETO PML-RARA WT1 CBFB-MYH11 JAK2 PCR液(ul) Taq酶/混合酶(ul) 人数(个) 批号
MLL-AF4 E2A-PBX1 PCR液(ul) Taq酶/混合酶(ul) 人数(个) 批号
注:
配置反应液(ul/test):RNA的PCR反应液:混合酶液=8:2;
相应内参PCR反应液:混合酶液=8:2。
DNA的PCR反应液:Taq酶=20:1;
野生型反应液::Taq酶=20:1。
③实验后:填写记录 清洁地面 消毒实验台面及器具 打开紫外灯 按标准操作程序处理废弃物。
操作者:
样本处理区(2区) 实验日期:
检测项目:□BCR-ABL210 □BCR-ABL190 □PML-RARA □WT1 □ETO □MLL-AF4 □E2A-PBX1 □CBFβ-MYH11 □JAK-2
实验前: □75%酒精擦拭实验台面 □__%次氯酸钠 记录室内温度: 湿度:无法记录
低温离心机:制冷:□正常 □不正常 离心:□正常 □不正常,异常处理措施:
②核酸提取步骤: 按基因扩增实验室标准操作程序对标本进行核酸提取及定量标准品混匀
主要步骤 完成情况 备注 1 样本解冻后+500ul氯仿,剧烈震荡,成乳糜状,15000rpm,10min; “+“表示已完成 2 取200ul上清+等量预冷异丙醇,震荡,静置10min; 3 15000rpm,10min; 4 弃上清,+300ul无水乙醇,静置10min; 5 15000rpm离心5min; 6 弃上清,短离,弃上清,室温静置; 7 乙醇挥发干后,+50ulDEPC水。
③按标准流程加样本 向混合好的PCR试剂中加提取步骤7中的15ul的RNA/4ul的DNA,排版如下:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A B C D E F G H
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A B C D
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