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Animal Protocol：_____________ 动物实验福利与伦理审查表 申请日期：201年1月日 申请人姓名（PI） 申请人单位 江南大学食品学院 PI联系方式 1 导师姓名/联系方式 /1456789890 课题名称 缓解小鼠急慢性锰毒性的效果评价 课题性质 中国第58批博士后基金“” 使用 动物 情况 品种品系 C57BL/6小鼠 动物来源 上海斯莱克实验动物有限公司 等级 SPF 规格 6~8周龄 数量（只） 104 ♀（只） 0 ♂（只） 104 计划进驻日期2016年月日 计划结束日期2016年月日 实验目的： XX菌缓解小鼠急慢性锰毒性的效果评价的研究 实验分组与处理： XX菌缓解小鼠急性锰中毒效果评价（约11月中旬结束） 本阶段预计11月初进行，11月中旬结束，然后进行样本取材和各种指标的测试，预计两周时间完成后续测试实验。 组别 分组描述 小鼠数量（只） 治 疗 组 对照组 1天自由饮用蒸馏水，1-2天灌胃0.2mL PBS复溶的13%脱脂乳作为对照 8 锰造模组 1天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg），1-2天灌胃0.2mL PBS复溶的13%脱脂乳 8 锰+活766 1天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg），1-2天灌胃小鼠1×109cfuXX菌766活菌粉悬浮液（0.2mL） 8 锰+死766 1天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg），1-2天灌胃小鼠0.2mLXX菌766死菌粉悬浮液（与活菌粉同重量） 8 锰+活 1天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg），1-2天灌胃小鼠1×109cfuXX菌766活菌粉悬浮液（0.2mL） 8 预 防 组 对照组 1-7天灌胃0.2mL PBS复溶的13%脱脂乳作为对照，8天灌胃小鼠0.2mL普通饮用水 8 锰造模组 1-7天灌胃0.2mL PBS复溶的13%脱脂乳，8天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg） 8 锰+活766 1-7天灌胃小鼠1×109cfuXX菌766活菌粉悬浮液（0.2mL），8天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg） 8 锰+死766 1-7天灌胃小鼠0.2mLXX菌766死菌粉悬浮液（与活菌粉同重量），8天灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg） 8 2. XX菌766缓解小鼠慢性锰中毒效果评价（约12月底结束） 本阶段预计11月上旬进行，12月下旬结束，然后进行样本取材和各种指标的测试，预计两个月时间完成后续测试实验。 分组名称 分组描述 小鼠数量（只） 对照组 每天灌胃0.2mL PBS复溶的13%脱脂乳作为对照 8 锰造模组 每天灌胃0.2mL PBS复溶的13%脱脂乳；将氯化锰溶于饮用水中使其浓度达0.6mg/mL, 供小鼠自由饮用 8 仅灌胃766 每天灌胃小鼠1×109cfuXX菌766活菌粉悬浮液（0.2mL），自由饮用蒸馏水 8 锰+766 每天灌胃小鼠1×109cfuXX菌766活菌粉悬浮液（0.2mL），将氯化锰溶于饮用水中使其浓度达0.6mg/mL, 供小鼠自由饮用 8 实验方法：将XX菌采用灌胃(1×109cfu/0.2mL /只/天)的方式到小鼠体内。乳酸菌处理方法为将冻干菌粉用PBS缓冲液复溶，菌浓度约1×109cfu/0.2mL，每只小鼠每天灌胃0.2 mL。 模型构建： 在急性锰中毒实验中，在治疗组中，对照组自由饮用蒸馏水，锰中毒实验组采用灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg），然后针对不同的组别灌胃XX菌766活菌、鼠李糖乳杆菌CCFM492活菌及XX菌766死菌。预防实验组中，针对不同组别先灌胃XX菌766活菌及XX菌766死菌，然后再灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中，使每只小鼠摄入剂量为250mg/kg）[1]。 在慢性锰毒性试验中，对照组自由饮用蒸馏水，锰中毒实验组采用灌胃0.2mL锰水（氯化锰溶于饮用水中使其浓度达0.6mg/mL, 供小鼠自由饮用），然后针对不同的组别灌胃XX菌766菌及灌胃XX菌766菌和锰水八周[2]。 测定指标： 小鼠粪便、皮毛及组织（肝脏、肾脏及脑）中金属元素锰的测定 收集小鼠粪便时，一只小鼠一个代谢笼进行粪便的收集。 小鼠血液、尿液及组织中生理指标测定。如小鼠血液中ALT和AST活性；肝脏、肾脏及脑中MDA和GSH含量以及SOD、GPx和CAT活性的测定，脑内苯并-α-芘羟化酶和7-乙氧基香豆素去乙基