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- 2018-03-09 发布于福建
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——还原糖鉴定、蛋白质鉴定、脂肪鉴定
前情提要:
关键词:还原糖、蛋白质、脂肪
难度系数:★★★
重要程度:★★★★
基础回顾:
考点内容要求考纲解读检测生物组织中还原糖、脂肪、和蛋白质Ⅱ1、 理解还原糖鉴定过程
2、 理解蛋白质鉴定过程
3、 理解脂肪鉴定过程考点一览:细胞中化合物的鉴定
技能方法:细胞中化合物的鉴定
1.斐林试剂和双缩脲试剂的比较
比较项目斐林试剂双缩脲试剂
不同点使用方法甲液和乙液混合均匀后即可使用,且现配现用使用时先加A液再加B液实质新配制的Cu???OH)2反应碱性条件下的Cu2+呈色反应条件需水浴加热不需加热即可反应反应
原理还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物颜色砖红色紫色浓度乙液CuSO4浓度为0.05_g/mLB液CuSO4浓度为0.01_g/mL相同点都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH浓度都是0.1_g/mL2.物质鉴定实验中重要操作归纳
(1)还原糖鉴定实验材料的要求
①浅色:不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料,防止颜色的干扰。
②还原糖含量高:不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。
(2)唯一需要加热——还原糖鉴定,且必需水浴加热,不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。
(3)非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂eq \o(――→,\s\up7(水浴),\s\do5(加热))现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。
(4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定,实验中50%酒精的作用——洗掉浮色。
(5)记准混合后加入——斐林试剂,且现配现用;分别加入——双缩脲试剂(先加A液,后加B液,且B液不能过量)。两者成分相同,但CuSO4的浓度不同,所以不能混用。
(6)若用大豆做材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其粘在试管壁上不易刷洗;且该实验应预留部分组织样液做对比。
3.物质鉴定的实验原理归纳
鉴定的物质化学试剂颜色反应生物组织中的淀粉碘液蓝色生物组织中的可
溶性还原糖刚配制的斐林试剂砖红色沉淀(水浴加热)生物组织中的蛋白质双缩脲试剂紫色反应生物组织中的脂肪苏丹Ⅲ染液
苏丹Ⅳ染液橘黄色(显微观察)
红色(显微观察)细胞中的DNA甲基绿绿色(显微观察)细胞中的RNA吡罗红红色(显微观察)4.利用“一同三不同”区分斐林试剂与双缩脲试剂
“一同”是指都含有NaOH和CuSO4两种成分,且NaOH溶液的质量浓度都为0.1 g/mL。
“三不同”分别指:(1)使用原理不同。斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液,双缩脲试剂的实质是碱性环境中的Cu2+。
(2)使用方法不同。鉴定还原糖时将甲、乙两液等量混匀后立即使用;鉴定蛋白质时先加A液1 mL摇匀,然后加B液4滴,振荡摇匀。
(3)CuSO4溶液的浓度不同。斐林试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.05 g/mL,双缩脲试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.01 g/mL。
5.三类有机物检测在操作步骤上的差异
(1)唯一需要加热——还原糖检测,且必须水浴加热,不能用酒精灯直接加热。若不加热,则无砖红色沉淀出现。
(2)唯一需要显微镜——脂肪检测。
(3)混合后加入——斐林试剂;分别加入——双缩脲试剂(先加A液,后加B液,且B液不能过量)。
【课堂巩固】
1.将面团包在纱布中放在清水中搓洗,鉴定粘留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是( )
A.碘液、苏丹Ⅲ染液 B.双缩脲试剂、碘液
C.双缩脲试剂、苏丹Ⅲ染液 D.碘液、斐林试剂
【答案】B
2.对下表中所列待测物质的检测,所选用的试剂及预期结果都正确的是( )
待测物质检测试剂预期显色结果①DNA甲基绿红色②脂肪苏丹Ⅲ橘黄色③淀粉斐林试剂蓝色④蛋白质双缩脲试剂紫色A.①③ B.②③ C.①④ D.②④
【答案】D
【解析】甲基绿应是将DNA染成绿色,斐林试剂用来检测还原糖,淀粉用碘液检测呈蓝色。
3.在可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择错误的是( )
A.马铃薯块茎中含有较多的糖且近于白色,可用于进行可溶性还原糖的鉴定
B.花生种子富含脂肪且
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