高三生物基础实验（人教版（上））：实验7　叶绿体色素的提取和分离含解析.docVIP

PAGE  ——叶绿体色素的提取和分离原理、色素的种类和吸收光谱、试剂的作用和实验成败关键 前情提要： 关键词：色素提取和分离的原理、色素的种类、试剂的作用 难度系数：★★★ 重要程度：★★★★ 基础回顾： 考点内容要求考纲解读叶绿体色素的提取和分离Ⅱ1、理解叶绿体色素的提取和分离原理 2、知道色素的种类和吸收光谱 3、理解实验中试剂的作用和实验成败关键考点一览： 考点一、实验的原理 （1）实验：绿叶中色素的提取和分离（纸层析法） ①可以利用无水乙醇提取绿叶中的色素，在研磨时还应加入少许二氧化硅和碳酸钙，其中前者有助于研磨充分，后者可防止在研磨中色素被破坏。 ②分离的原理是利用色素在层析液中的溶解度不同，溶解度越大的在滤纸上扩散的快，反之则慢。 考点二、色素的种类和吸收光谱 色素种类颜色吸收光谱滤纸条上位置叶绿素 （约占3/4）叶绿素a蓝绿色主要吸收红光和蓝紫光中下层叶绿素b黄绿色下层类胡萝卜素 （约占1/4）胡萝卜素橙黄色主要吸收蓝紫光上层叶黄色黄色中上层技能方法： 1．提取绿叶中色素的关键 （1）叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅速、充分以保证提取较多的色素。 （2）滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以防止滤液挥发。 （3）称取绿叶的质量和加入无水乙醇的体积要适当，以保证提取液的浓度。 2．分离绿叶中色素的关键 （1）滤液细线不仅要细、直，而且要含有较多的色素，因此要在滤液干后，重复画1～2次。 （2）滤纸上的滤液细线不能触及（或没入）层析液，否则会使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色素带，使实验失败。 3． 实验流程 提取色素eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(取材：称取5 g绿色叶片,　↓,研磨：加少许SiO2、CaCO3和10 mL无水乙醇,　↓,过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布,　↓,收集：收集滤液，试管口用棉塞塞严)) 制备滤纸条eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(干燥滤纸,　↓,剪滤纸条：将滤纸剪成长与宽略小于试管长和宽,　 　的滤纸条，并在一端剪去两角,　↓,铅笔画线：在距剪去两个角一端1 cm处用,　 　铅笔画一条细的横线)) 画滤液细线eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(用毛细吸管吸取少量滤液,　↓,画线：沿铅笔线画出一条细线,　↓,待滤液干后，重复画一两次)) 分离绿叶中的色素eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(将3 mL层析液倒入试管中，,?装置如图所示?插入滤纸条,?有滤液细线的一端朝下?，,随后用软木塞塞紧试管口。,注意：不能让滤纸条上的,滤液细线触到层析液)) 4、由操作要求探究操作目的 操作要求操作目的提 取 色 素选新鲜绿色的叶片使滤液中色素含量高研磨时加无水乙醇溶解色素加少量SiO2和CaCO3研磨充分和保护色素迅速、充分研磨防止乙醇挥发，充分溶解色素盛放滤液的试管管口加棉塞防止乙醇挥发和色素氧化分 离 色 素滤纸预先干燥处理使层析液在滤纸上快速扩散滤液细线要细、直、齐使分离出的色素带平整不重叠滤液细线干燥后再画一两次使分离出的色素带清晰分明滤液细线不触及层析液防止色素直接溶解到层析液中5．绿叶中色素提取和分离实验异常现象分析 （1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析 ①未加石英砂（二氧化硅），研磨不充分。 ②使用放置数天的叶片，滤液色素（叶绿素）太少。 ③一次加入大量的无水乙醇（正确做法：分次加入少量无水乙醇提取色素）。 ④未加碳酸钙或加入过少，色素分子被破坏。 （2）滤纸条色素带重叠：滤纸条上的滤液细线接触到层析液。 （3）滤纸条看不见色素带 ①忘记画滤液细线或没有提取出色素。 ②滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。 【技巧归纳】实验设计的四大基本原则 （1）单一变量原则：即除自变量（实验变量）以外，应使实验组与对照组的无关变量保持相同且适宜。如生物材料相同（大小、生理状况、年龄、性别等）、实验器具相同（型号、洁净程度等）、实验试剂相同（用量、浓度、使用方法等）和条件相同（保温或冷却、光照或黑暗、搅拌、振荡等）。 （2）对照原则：应设置对照实验，使实验组与对照组的自变量不同（其余因素都相同），以便减小实验误差。 （3）平行重复原则：在实验设计中为了避免实验结果的偶然性，必须对所做实验进行足够次数的重复，以获得多次实验结果的平均值，保证实验结果的准确性。 （4）科学性原则：指在设计实验时必须有充分的科学依据，即实验目的要明确，实验原理要正确，实验研究的材料和实验方法的选择要