[理学]遗传学第七章2.pdf

第7章 细菌的遗传分析 本章主要以大肠杆菌为材料，讨论： 1、 细菌的遗传物质的传递规律 2 、细菌染色体作图 3、细菌同源重组的分子机制 7.1 细菌的细胞和基因组 7.1.1 细菌的细胞 细菌: 真细菌（eubacteria）如大肠杆菌（Escherchia coli） 古细菌（ archaebacteria）如詹氏甲烷球菌 （ Methanococcus jannasch ） 多种形态存在：球菌（ cocci ） 杆菌（bacilli ） 螺旋菌（ sprilla）等 大小：随种类不同而异 杆菌一般长1～ 5㎛，宽0.5～ 1 ㎛； 球菌以直径大小表示，一般为0.5～ 1 ㎛； 螺旋菌一般长为1～ 50 ㎛ ，直径为0.5～ 1 ㎛ 细菌结构简单：其基本结构，包括细胞壁、细胞膜、拟核、 核糖体、细胞质及内含物； 特殊结构 如荚膜和鞭毛 世代时间短，20分钟一代， 容易得到生化突变型。 单细胞，遗传物质 环状核酸分子——基因带/线（genophore ） 也可称染色体。 单细胞→菌落（clone ）/菌株（strain ） 野生型菌株 原养型 prototroph 营养缺陷型 auxotroph 细菌与细菌之间可有遗传物质的交换 细菌染色体不凝缩，没有着丝粒，也 没有纺锤体结构。 细菌繁殖：双链环形DNA分子随着细胞 伸长而采取二分分裂（ binary fission） 的方式分开。 7.1.2 细菌的基因组 细菌染色体大多为裸露的环状闭合DNA双链，没有组蛋白 和其他蛋白质结合，也不形成核小体结构。位于细胞内一个 称为“拟核” （nucleoid）的区域中。这种结构有利于外源 DNA的插入。细菌的染色体长度为250～ 35 000 μm 不等。 （1）拟核结构 电镜观察表明：拟核结构最显著的特征是其DNA被包裹压缩成一个个有 序的环状结构域(loop domain)。 大肠杆菌基因组长4.7 ×106 bp，在松弛状况：1 300 μm长，是其细 胞长度的1 000倍，必须压缩最少1 000倍后才能装入细胞中。 对拟核成分分析表明，DNA 占80 ％，其余为RNA和蛋白质。已分离出 HU、H1等DNA结合蛋白，类似于真核染色体的结构蛋白，可能与结构域 的形成有关。大肠杆菌拟核中约有100个结构域，每个相当于40 kb，各 个结构域具有相对的独立性。染色体(拟核)的结构域是超螺旋结构。这是 DNA双螺旋的螺旋轴盘绕而形成的螺旋，是DNA三级结构的一种形式。 如果用DNA酶处理大肠杆菌拟核中，各结构域DNA链将会断裂，超 螺旋结构受到破坏，变为松弛型结构。拟核的中央部分为支架蛋白和 RNA。若用RNA酶处理，拟核中DNA的折叠结构即不能保持，说明RNA 和支架蛋白是保持拟核结构的重要因素 （2）E.coli基因组概况 E.coli的染色体为闭合双链环状DNA，长约1333um. 1997年测定完成E.coli K-12 MG1655菌株全基因组: 6 4,639，221（约4.7×10 ）bp 其中： 87.8％编码蛋白质