半衰期测定——任衍开.ppt

磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定 新乡医学院三全学院 任衍开 一、实 验 目 的 1.掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法 2.掌握药物半衰期的计算方法 3.了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意 义 二、实 验 原 理 1.多数药物在体内按一级动力学规律消除,静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。 2.药物血浆半衰期（half life，T1/2）为： Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1 二、实 验 原 理 3.呈色原理： 磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类 化合物起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。 偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。 三、实 验 动 物 家兔（体重2.5Kg左右） 四、实 验 器 材 和 药 品 1. 器材：分光光度计、离心机、兔手术台、手术器 械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、 移液管、离心管、试管等 分光光度计 离心机 四、实 验 器 材 和 药 品 2.药品：20%磺胺嘧啶钠溶液、1%肝素钠溶液、 0.02%磺胺嘧啶钠溶液（标准液）、 7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亚硝酸钠溶液、 0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、 20%乌拉坦溶液、蒸馏水 五、实 验 步 骤 （一）动物基本操作 （二）测定液和标准液的配制 （三）比色管的配制 （四）比色与计算 （一）动物基本操作(血液标本的采集） 1. 抓取家兔1只，称重，用20％乌拉坦溶液5mL/kg行耳缘静脉麻醉，然后固定于手术台上。 2.气管插管 手术区剪毛，沿正中线剪开颈部皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉，找出并游离气管，穿线备用。确定甲状软骨的位置，在其下3——4环装软骨处切一倒“T”形切口，插管固定。 (一)动物基本操作(血液标本的采集） 3.游离颈总动脉：分开肌肉层后，找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm左右，在其下穿线两根线备用。 （一）动物基本操作 4.全身肝素化：耳缘静脉注射肝素5ml。 线1结扎远心端，待血管充盈后，动脉夹夹闭近心端 远心端剪一“V”形口，动脉插管，线2结扎固定（二次固定） 5.动脉插管（肝素润洗） （一）动物基本操作 6.取血：打开动脉夹取空白血样2ml置于用肝素浸过的试管中待用；然后由耳缘静脉注射20％磺胺嘧啶钠溶液2ml/kg，于给药后10min及40min各取血2ml，分别置于同上试管中待用 （二）测定液和标准液的配制 测定液的配制：用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml，置于已盛有5.8ml 7.5％三氯醋酸溶液的玻璃试管中，充分摇匀，然后以1500r/min，离心5min待用。 标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠溶液0.2ml，加入已装有5.8ml 7.5％三氯醋酸溶液试管中，摇匀待用。 成分 空白管（mL） 标准管 （mL） 测定管（mL） 给药前 给药10min 给药40min 测定液 / / 1.5 1.5 1.5 标准液 / 1.5 / / / 蒸馏水 1.5 / / / / 0.5％NaNO2 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5％麝香草酚 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 （三）各比色管的配制 蒸馏水 0.02%NaSD ②1组标本各取0.2ml加入2组 ①2组各试管先加 三氯乙酸5.8ml ③2组测定液各取1.5ml清液加入3组 ④加0.5mlNaNO2 ⑤加1ml麝香草酚 标本 （1组） 测定液（2组） 比色液（3组） 空白管 标准管 给药前 药后10′ 药后40′ 取13支试管 分别用记号笔 标记 （四）比色与计算 用722型分光光度计进行比色，选波长520nm，以空白管调“0”点，读出标准管及各测定管光密度，并记录。 六、实 验 结 果 标准管 测定管 给药前 给药后10min 给药后40min 光密度值 1.各比色管的光密度值 六、实 验 结 果 2.计算Ke 及T1/2 Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1 CNaSD=C标/OD标×（OD给药后-OD给药前） 七、注 意 事 项 1.麻醉时一定把握好速度。 2.每次取血之前要先将残血放掉。 3.各盛血的试管及动脉插管要用肝素浸润，动脉插管前要先注射肝素(全身肝素化)。 4.将血样加到三氯醋酸试管中应边加边摇匀，否则易出现血凝块