不同启动子控制下木酮糖激酶的差异表达及其对酿酒酵母木.PDFVIP

Research Paper 研究报告 微生物学报 A cta M icrobiolog ica Sinica 5 1 (7 ):9 14 － 922 ;4 July 20 11 ISSN 000 1 － 6209 ;CN 11 － 1995 / Q http :/ / journals． im ． ac ． cn / actamicrocn 不同启动子控制下木酮糖激酶的差异表达及其对酿酒酵母木 糖代谢的影响 # # * ， ， ， 彭炳银 陈晓 沈煜 鲍晓明 ， ， 250 100 山东大学 微生物技术国家重点实验室 济南 :【 】 ， 摘要 目的 以不同强度的启动子控制表达木酮糖激酶基因 并研究其引起的不同木酮糖激酶活性水平对 (Saccharomyces cerevisiae ) 。【 】 CEN ． PK 113 -5 D 木糖利用酿酒酵母 代谢流向的影响 方法 以酿酒酵母 为出发 ， TEF 1p ，P GK 1p HXK2p ， Cre-loxP ， 菌株 选择酿酒酵母内源启动子 和 利用 无标记同源重组系统 置换染色体上 XKS 1 (XKS 1p ) ; ， 木酮糖激酶基因 的启动子 序列 并通过附加体质粒引入木糖代谢上游途径 构建不同水平表 ; 、 、 ATP 达木酮糖激酶的木糖利用工程菌株 从木酮糖激酶的转录水平 酶活水平 胞内的 浓度及木糖代谢等性 ， 。【 】 ， ， 状 对各菌株进行评价 结果 转录及酶活测定结果显示 与天然状态相比 所选择的启动子对木酮糖激酶 。 XKS 1 均表现出更强的启动效率 菌株体内表达木酮糖激酶活性水平由高至低的顺序为其基因 在启动子 P GK 1p 、TEF 1p 、HXK2p XKS 1p 。 ， ATP ， 和 控制下 随着木酮糖激酶的活性的提高 胞内的 水平下降 而转化木糖 。 0. 35 g / g ， ， 0. 18 g / g 生成乙醇的能力上升 最高乙醇产率为 消耗的总糖 此时副产物木糖醇产率最低 为 消 。【 】 ， 。 ， 耗的木糖 结论 通过在染色体上置换启动子 提高了木酮糖激酶的表达