[高等教育]分子生物学课件第17讲.ppt

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[高等教育]分子生物学课件第17讲

第四节 分解代谢产物抑制涉及的启动子正调控 一、分解代谢产物抑制 1,某些启动子转录的起始需要辅助蛋白质 2,分解代谢产物抑制 含义 原因 二、CAP对启动子的正调控 1,cAMP在分解代谢产物抑制中的作用 2,CAP的作用 (1)CAP的结构特征 (2)CAP结合的DNA位点 (3)CAP的激活 (4)CAP对转录的激活作用 A,CAP激活转录的途径 B,CAP与DNA和RNA聚合酶的作用 C,CAP对RNA聚合酶的作用取决于两者的相对位置: 第四节 操纵元的其他调控形式 一、具有双启动子的半乳糖操纵元 (一)半乳糖代谢 1,半乳糖代谢相关的酶 (1)半乳糖激酶 (2)半乳糖转移酶 (3)半乳糖表异构酶 2,代谢步骤 (二)gal操纵元 1,gal操纵元组成 (1)结构基因(galK,galT,galE) (2)调节基因(galR) (3)P/O位点 2, gal操纵元的启动子(图8-9) (1)gal P1 (2)gal P2 (三)cAMP-CAP对galP1和gal P2的控制 1,gal启动子的cAMP-CAP结合位点 (1)位置:-76~-47 (2)序列特点(图8-10) 2,cAMP-CAP对S1转录的激活及对S2转录的阻遏 对galP1 对galP2 (四)Gal阻遏蛋白的作用机制 1,gal阻遏蛋白的作用位点 2, gal阻遏蛋白可能的作用机制 (1) gal阻遏蛋白与galOE结合,可能通过以下途径发挥作用 (2) gal阻遏蛋白与galOI结合可能导致两个操作子之间的DNA形成环状结构,两个阻遏蛋白通过相互作用而强化了阻遏效应 (五)gal操纵元双启动子的意义 1,半乳糖的双重作用 (1)作为细菌的碳源 (2)UDPGal是细菌细胞壁的重要前体 2,双启动子的作用 (1)galP1保证细菌可以利用半乳糖作为碳源 (2)galP2保证有葡萄糖存在时,细菌可以合成UDPGal 二、阿拉伯糖操纵元:具有双重功能(正调控和负调控)的调节蛋白 (一)阿拉伯糖代谢酶基因的操纵元 1,阿拉伯糖调控元 (1)三个参与阿拉伯糖代谢的酶的基因的操纵元 (2)调控元:由一个调节基因控制几个操纵元的系统 2,araBAD操纵元的组成 (1)结构基因 (2)操纵元结构(图8-11) (二)araBAD操纵元的调控 1,araC基因产物及其结合位点 (1)araC基因对araBAD正调控的遗传学证据 (2)AraC蛋白的2种形式 (3)AraC结合位点 2,对araBAD操纵元起调控作用的因素 (1)Crep 对araBAD 及araC的作用 A,Crep 与araO1结合 B,Crep 与araO2结合 (2)Cind对araBAD 及araC的作用 (3)cAMP-CAP是araBAD和araC表达的正调控因子 3,araBAD操纵元的调控(图8-12) (1)无AraC及cAMP-CAP时,araC转录,但很快会被Crep所阻遏(自身调控) (2)有AraC,无cAMP-CAP时,araBAD和araC均不转录 (3)有AraC,阿拉伯糖及cAMP-CAP时,araBAD转录 (4)Cind 和cAMP-CAP促进araBAD转录的机制 促进RNA聚合酶与araBAD的结合并形成开放性启动子复合物 ?三、 色氨酸操纵元:可阻遏系统 (一)? trp操纵元的结构 1, 结构基因及其编码的酶 2,前导序列 3,终止子 4,调节基因 (二)Trp操纵元的阻遏调控 1,Trp的作用 Trp有两方面的作用 (1)对已有的酶起反馈抑制(feedback inhibition) (2)作为trp无活性的阻遏蛋白的辅阻遏物 2,TrpR的作用 (1)TrpR的活性形式 (2)TrpR的作用机制 第五节 基因表达的时序调控 时序调控:按照一定的时间顺序实现的基因表达调控机制 基因转录时序调控的必要性:使生物能够有效地利用资源,避免某些基因不适当表达可能带来的危害 基因转录时序调控的方式:大多数是通过一种或几种蛋白质因子与RNA聚合酶相互作用而实现的 一、噬菌体基因表达特点概述 (一)噬菌体基因组构成 1,基因构成 (1)转录和翻译所必需的基因 感染初期噬菌体均利用宿主的转录系统,随后噬菌体合成一些自身编码的蛋白质,对宿主的RNA聚合酶进行替代或修饰,其结果是使转录系统优先转录噬菌体的mRNA。噬菌体倾向于使用宿主的蛋白质合成系统 (2)DNA复制相关基因 噬菌体常利用宿主的复制体系成分,这些基因与复制的起始有关,有的噬菌体基因组编码DNA聚合酶和某些复制相关的蛋白质 (3)噬菌体颗粒结构和装配相关基因 通常,噬菌体的头部和尾部需要许多种蛋白质,因此,噬菌体晚期功能区构成了基因组的最大部分 2,遗传图谱的特点 噬菌体的遗传图谱的组织常常反映其基

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