延揽优秀人才工作报告表.pdfVIP

國立成功大學 「邁向頂尖大學計畫」   延攬優秀人才工作報告表 NCKU ’s “Aim for the Top University Project” Work Report Form for Distinguished Scholars □續聘continuation of employment ■離職resignation 100 年7 月13 日更新 受聘者姓名 陳昭中 �男 ■女 聘 期 from 100 年(y) 08月(m) 04日 (d) Period of Name of the Employee Male Female to 102 年(y) 07月(m)31日 (d) Employment 研究或教學或科技研發與 藍色螢光蛋白結構解析及其在 計畫主持人 許 桂森 管理計畫名稱 有氧及無氧環境中作為生體影 （申請單位主管） The project title of research, Project Investigator teaching, technology 像標識蛋白之應用 (Head of development and management Department/Center) 補助延聘編號 HUA - - - Grant Number 一、研究、教學、科技研發與管理工作全程經過概述。 （由受聘人填寫 ） Please summarize the entire research, teaching, or science and technology RD and management work process (To be completed by the employee) 1. 工作主要內容：利用 分子生物技術(易錯 PCR)來改進藍色螢光蛋白亮度，並研究藍色螢光蛋白 作為標識蛋白的應用，同時來開發藍色螢光蛋白在厭氧環境下的應用，並同時協助完成解析 藍色螢光蛋白發光原理。在改進螢光蛋白亮度方面，目前已有進展，同時也開發完成藍色螢 光蛋白在厭氧環境下的應用。先前的研究利用易錯PCR 以獲得比野生株藍色螢光蛋白更亮4 倍的突變株命名為 D7 ，以突變株D7為易錯 PCR的模版進行隨機突變，並將易錯 PCR獲得的產 物接到pUC19質體中轉型至 E.coli 經過24 小時培養後，利用UV照射先以肉眼觀察所產生藍 色螢光亮度是否比 D7亮，若比 D7還亮進一步進行螢光儀檢測，比較螢光強度是否有差異， 經過數次易錯PCR的實驗篩選過數千顆突變株後，得到數 10顆突變株點以肉眼觀察螢光亮度 比起D7更亮，將質體進行 DNA 序列定序後發現在胺基酸中都有不同的突變點產生，如 I14V,R38S,T55A,S177N,K199R,A207T, K137P 等其中有一突變株命名為D8 比起D7更亮，經過 定序分析後發現D8 比起D7有 3處胺基酸序列之改變（N58Y,A62T,K199R），而此結果也經過 螢光儀檢測證實 D8 比D7更亮，再利用 D8為易錯 PCR的模版進行隨機突變，獲得一突變株命 名為 D9 其亮度比起D8更亮，經過定序分析後發現 D8 比起D7有 1處胺基酸序列之改變（S176Y）。 後續再以 D9 突變株質體作為易錯 PCR的模版進行隨機突變 ，篩選了2萬顆左右的菌株，首先 以肉眼進行初步篩選出比D9 突變株更亮或一般亮之突變株約50 株突變株，但是經過螢光儀 測定後約 45