第49章 基因治疗药物.ppt

第四十九章 基因治疗药物 本章目录 一、概论 基因治疗是指改变细胞遗传物质为基础的医学治疗。 将具有正常功能的基因置换或增补患者体内的缺陷基因，从而达到治疗疾病的目的。 基因治疗药物（基因药物）： 携带目的基因或核算分子的载体或遗传修饰的体细胞。 基因工程药物：有治疗价值的目的基因导入细菌、酵母或哺乳动物细胞或转基因动植物等宿主细胞进行表达并经分离和纯化获得蛋白质产物，如活性蛋白质、多肽药物、重组疫苗和单克隆抗体。 基因治疗类型 按操作方式分： 基因增强（修饰）和基因失活（封闭） 基因修正和基因置换 按靶细胞类型分： 生殖细胞基因治疗 体细胞基因治疗 基因增强（修饰）又称为补偿性基因治疗 是指不去除异常基因，将有功能的正常基因导入病变细胞或 其它细胞后发生非定点整合，表达正常产物以补偿缺陷基因的功能，或使原有的功能得以加强，目前多采用。 基因失活（封闭）反义基因治疗 指采用反义（antisense）技术或反基因（antigene）、基因敲除（gene knock-out）等技术，阻断某些基因的异常表达 基因修正和基因置换 指通过同源重组或基因打靶技术，将正常基因定点整合到靶细胞基因组内,以原位替换致病基因。 不涉及基因组整体改变的情况下对缺陷基因进行精确的原位修复，是最理想的治疗方式。 基因治疗条件 目的基因的准备 要进行基因治疗，必须首先获得目的基因并对其表达调控进行详细研究。目的基因来源有多种，主要包括：含目的基因的供体细胞的基因组DNA分离、预先分离克隆的基因、PCR扩增的基因及人工合成的基因。 靶细胞的选择 根据治疗目的选择不同的体细胞 已被应用的靶细胞有淋巴细胞、造血细胞、上皮细胞、角质细胞、成纤维细胞、肝细胞、肌细胞及肿瘤细胞。 基因治疗的途径---按照不同疾病和导入基因的不同性质选择 体外途径(ex vivo)——间接法，回输法 是指在体外将目的基因导入靶细胞，经过筛选和增殖后将细胞回输给患者，使该基因在体内有效地表达相应产物，以达到治疗的目的。 体内途径(in vivo)——直接法 是指将目的基因直接导入体内有关的组织器官，使其进入相应的细胞并进行表达。 In vivo or ex vivo gene therapy 二、基因转移方法 病毒介导和非病毒介导 1.非病毒介导的基因转移—理化方法 脂质体介导法 受体介导法 裸DNA直接注射法和微粒子轰击法 2.病毒介导的基因转移 该类方法是以病毒为载体，将目的基因导入靶细胞或器官，并使之表达。一般在基因转移中，所使用的病毒载体都是经过改建的有复制缺陷的病毒，如逆转录病毒、腺病毒和慢病毒载体。 三、基因治疗应用 遗传疾病基因治疗 恶性肿瘤基因治疗 其他疾病（高血压、糖尿病、冠心病等）的基因治疗 恶性肿瘤基因治疗 1.免疫基因治疗 (1) 细胞因子基因治疗 IL-2、IL-4、IL-1、IL-6、IL-7、IL-12、 INF-γ、TNF-α、G-CSF、GM-CSF (2) 免疫增强基因疗法 MHC I类抗原、共刺激分子 (3) 肿瘤DNA疫苗疗法 癌胚抗原（CEA）制备的肿瘤DNA疫苗 免疫基因治疗 (2) 自杀基因疗法 将一些来源于病毒或细菌的基因导入肿瘤细胞 该基因表达产生的酶可催化无毒性的药物前体转变为细胞毒性物质，从而杀死肿瘤细胞； 同时通过“旁观者效应”（bystander effect）杀死邻近未导入该基因的分裂细胞而显著扩大杀伤效应。 由于携带该基因的受体细胞本身也被杀死，所以这类基因被称为“自杀基因”。 (3) 辅助性基因治疗 指将编码抗细胞毒性药物蛋白的基因导入人体细胞，以提高机体耐受肿瘤化疗药物的能力。 如将多药抗性（multiple drug resistance, MDR）基因MDR-1导入骨髓造血干细胞，减少骨髓受抑制的程度，以加大化疗剂量，提高化疗效果。 四、基因治疗问题和前景 提供更多可供利用的有治疗价值的目的基因 设计高效的基因转移载体 解决基因治疗的靶向及表达调控问题 基因治疗简便性 充分估计导入外源基因对机体的不利影响 伦理学问题 思考题 什么是基因治疗？什么是基因治疗药物？ 恶性肿瘤基因治疗方法包括哪些方法？ * 一 概论 二 基因转移方法 三 基因治疗应用 四 基因治疗问题和前景 基因治疗条