生化-第三章-酶.ppt

2.非竞争性抑制 定义： I与S结构不相似，与酶活性中心外必需基团结合，酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶构象改变。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。例如，某些金属离子 特点：不能通过增加作用物的浓度消除抑制剂的影响。 酶促反应Vmax降低，Km值不变。 3. 反竞争性抑制 定义： I只与ES复合物结合，不与游离E结合。 酶促反应Vmax降低，Km值降低。 可逆性抑制 * ESI复合物不能进一步释放出产物 * 当I 与ES结合后, 使中间产物ES的量下降, 这样,即减少从中间产物转化为产物的量, 也同时减少从中间产物解离出游离的酶和底物的量. 3.温度对反应速度的影响 酶的最适温度：温度即不过高引起酶的变性，也不过低延缓化学反应的进行，反应进行的速度最快，此时的温度即为～。 不是酶的特征性常数。 体内多数酶的最适温度为37℃左右。 4.pH对反应速度的影响 酶的最适pH： 在某一pH值时，酶的各种基团处于最佳电离状态，酶的催化效率最高，此时的pH值称～。 不是酶的特征性常数。 体内多数酶的最适pH接近中性。 5.激动剂对酶反应速度的影响 激动剂 凡能使酶活性增强的物质。 如金属离子、氯离子等 作用机理： 可能与酶、作用物结合形成复合物而起促进作用。 可能参与酶活性中心的构成。 6.抑制剂对反应速度的影响 抑制剂：凡能使酶活性下降但又不引起酶蛋白变性的物质，称～。 多与酶催化中心的内、外必需基团结合，抑制酶的催化活性；去除抑制剂，酶活性可以恢复。 抑制作用的分类： 不可逆性抑制 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 抑制剂 可逆性抑制 这类抑制剂与酶活性中心的内、外的 必需基团结合形成 牢固不可逆的共价结合，降低酶活性。不能用透析等方法去除，由它引起的抑制作用称不可逆抑制作用。但可用某些药物解毒。 不可逆性抑制 二巯基丙醇BAL 可逆性抑制 定义： 这类抑制剂以非共价键与酶结合，使酶活性降低或丧失。采用透析或超滤等方法可以去除，由它引起的抑制作用称可逆抑制作用。 分类： 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 Ki：EI的解离常数，抑制常数 EI不能转变成产物 １. 竞争性抑制作用 定义:抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。 + I EI E + S E + P ES 反应模式 竞争性抑制的动力学方程: v= Vmax[S] Km(1+[I]/Ki)+[S] 1v = Km Vmax (1+ ) + [I]Ki 1 [S] 1 Vmax 竞争性抑制的特征曲线： ? [ I ] 正常 1v 1 [S] 1 Vmax -1 Km(1+ ) [I] Ki -1 Km Vmax 不变， 表观Km增大 * 举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 应用：磺胺类药物作用机理 NH2 SO2 NHR NH2 COOH （对氨基苯甲酸，合成 二氢叶酸的底物） （磺胺类药物） 细菌 对氨基苯甲酸 二氢叶酸合成酶 叶酸 核苷酸 磺胺类药物 人体 可从食物摄取叶酸，核酸的合成不受磺胺药物影响 2. 非竞争性抑制（noncompetitive inhibition） * 反应模式 E+S ES E+P + I EI+S EIS + I 非竞争性抑制的动力学方程: 1v = Km Vmax (1+ ) + [I]Ki 1 [S] 1 Vmax （1+ ） [I]Ki 非竞争性抑制的特征曲线： 1v 正常 ? [I] 1 [S] -1 Km 1 Vmax (1+ ) [I]Ki Vmax↓ Km不变 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系； 抑制程度取决于抑制剂的浓度；与底物浓度无关 动力学特点：Vmax降低，表观Km不变。 非竞争性抑制的特点： ３. 反竞争性抑制 * 反应模式 E+S E+P ES + I ESI 反竞争性抑制的动力学方程: v= Vmax[S] Km +(1+[I]/Ki) [S] 1v = Km Vmax (1+ ) [I]Ki 1 [S] 1 Vmax 反竞争性抑制的特征曲线： ? [ I ] 正常 1v 1 [S] 1 Vmax -1 Km [I] Ki + (1+ ) -1 Km 1 Vmax (1+