细菌学检验_教学课件_2.ppt

第二章 细菌学检验基本技术 本章内容 第一节 样本的采集与送检 第二节 细菌的形态结构检查法 第三节 细菌的分离培养方法 第四节 细菌的生化反应检查法 第五节 细菌的血清学检验 第六节 细菌毒素的检测 第七节 细菌数量的检测 第八节 细菌L型检查 第一节 标本的采集与送检 临床样本的采集与送检 食品卫生细菌学检验样本的采集和送检 化妆品细菌学检验样本的采集及送检 生活饮用水细菌学检验样本的采集及送检 消毒及卫生用品细菌学检验采样及送检 空气样本的采集与送检 一、临床样本的采集与送检 (一)标本采集的一般原则 1．早期采集：应争取在使用抗生素之前采集； 2．无菌采集：避免杂菌污染； 3．根据致病菌在不同病期的体内分布和排出部位，采取不同标本。尽可能采集病变明显部位的材料。 4．采集适量标本：特别是无菌部位的标本。 5．安全采集 6.标本必须新鲜，采集后尽快送检； 7.送检过程中要采取适当的保存方式。 (二)不同标本采样方法有所不同 1．血及骨髓样本的采集：采静脉血. 2．尿液样本的采集：晨起第一次尿液；中段尿或肾盂尿。 3．粪便样本的采集：脓血粘液便、肛拭子。 4．痰样本的采集：咳痰法、胃内采痰、咽拭子等。 5．上呼吸道样本的采集：清水反复漱口后，咽后壁拭子。 6. 其他临床样本的采集：脓汁(拭子、吸管) ；脑脊液(穿刺)； (三)标本的送检与处理 1.对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检。 2.其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。 3.若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存。 4.一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。 ５.病人标本中可能含有大量致病菌，必须注意安全防护。 ６.标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。 ７.对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须按规定包装，由专人运送。 ８.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。 二、食品卫生细菌学检验样本的采集与送检 (一)样本采集原则 采样应具有代表性。食物中毒时采集可疑食物。 采样种类： 大样：一整批样本。 中样：从样本各部分取得的混合样本，一般为200g。 小样(检样)：作分析用的样本，一般为25g。 二、食品卫生细菌学检验样本的采集与送检 (二)样本采集方法 无菌采集。 尽量采集有包装的食品，包装应完好无损。 粉末状的样本，应边取样边混合。 液体样本应摇振混匀采集。 冷冻食品就保持冷冻状态。 非冷冻食品需冷藏保存。 二、食品卫生细菌学检验样本的采集与送检 (三)采样的数量 食品种类不同，采样的数量也不同。 (四)注意事项 做好标记：标明采样品名、来源、数量、编号、采样人、采样时间地点等。 尽快送检，一般应不超过3h。 一般阳性样本在发出报告3d方能处理样本。进口食品的阳性样本需保存6个月才可处理。 三、化妆品细菌学检验样本的采集与送检 (一)采样数量 每批样本从两个以上大包装中随机抽取4瓶包装单位送检。 从两个包装单位以上的样本中共取10g或10ml检验。 (二)样本的处理 亲水性样本：加到装有玻璃珠及90ml灭菌盐水的三角烧瓶中振荡混匀。 疏水性样本：加入灭菌研钵中，加灭菌液状石蜡、吐温-80研磨后， 加灭菌盐水于水浴中混匀。 三、化妆品细菌学检验样本的采集与送检 (三)样本送检原则及注意事项 维持样本污染原状 去除残留防腐剂及抑菌剂 注意事项 样品的详细标记 尽快送检 微生物检验优先 四、生活饮用水细菌学检验样本的采集与送检 (一)采样点选择：具代表性 P22 (二)采样器具： 手工采样：采样瓶 自动采样器采样 (三)注意事项： 尽快送检 无菌操作 做好标记 五、消毒及卫生用品细菌学检验样本的采集与送检 一次性使用卫生用品 样本采集：同一批号3个运输包装中至少随机抽取12个最小包装量. ?样本用于检测， ? 用于留样， 2/4用于复检。 样本保存及送检：尽快送检，避免污染。 六、空气样本的采集与送检 (一)空气微生物采样器分类 按采样方式不同分为：I 类，II类 按采样器的流量分为：大、中、小三类 按采样器的工作原理分为：撞击式、沉降式等 (二)空气中细菌等微生物采样方法及送检 平板沉降法：室内面积＜30m2，三点采样。 ＞30m2，五点采样。 空气采样器：P25 第二节 细菌的形态学检查 1.包括不染色标本检查法和染色标本检查法。 2.镜检可以了解有无细菌及大致的菌量。 3.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类。 4.通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考