总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法).pdfVIP

上海源叶生物科技有限公司 总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法) 产品简介： 铁是人体必需微量元素，总含量约为3270mg。铁分布较广，有 67.6%的铁作为血红 蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中，参与铁的运输 ；骨骼和肌红蛋白中各存在 2.59%和 4.15%，储存铁约占25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合，因此测定血清 铁时，首先需要 Fe3+ 与转铁蛋白分离。总铁结合力(TIBC)是指血清中转铁蛋白能与铁结合 的总量。 源叶生物 总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法)是采用分光光度法以亚铁嗪为 底物进行总铁结合力的检测，是将过量的铁加入待测血清、血浆中，使铁与多余的转铁蛋白 结合，游离铁被铁吸附剂吸附除去。在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解 离出来，再被还原剂还原为 Fe2+ ，后者与亚铁嗪生成紫红色化合物，通过分光光度计检测 562nm 处吸光度值，适用于检测血清、血浆样品中的总铁含量，即为总铁结合力(TIBC)。 上述检测方法属于直接检测法，应 血清空白，纠正血清本身的色度，根据公式计算出铁含 量。该检测试剂盒在 140μmol/L 以下线性关系良好，甘油三脂≤3.39mmol/L，胆红素≤171 μmol/L，对本法基本无干扰。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 产品组成： 50T 试剂(A): 铁标准(100μg/ml) 3ml 4℃ 避光 试剂(B): TIBC 铁标准稀释液 30ml RT 试剂(C): TIBC Assay buffer 60ml 4℃ 试剂(D): 亚铁嗪显色液 3ml 4℃ 避光 试剂(E): ddH2O 10ml RT 试剂(G): 铁吸附剂 3g RT 自备材料： 1、离心管或试管 2、比色杯 3、分光光度计 操作步骤(仅供参考) ： 1、制备处理样品铁溶液和铁标准工作液：取适量铁标准 (100μg/ml)，按铁标准 (100μ 400-666-5481 g/ml) ：TIBC 铁标准稀释液=1:9 的比例配制铁标准(10μg/ml)，作为处理样品铁溶液； 同时按铁标准(100μg/ml) ：TIBC 铁标准稀释液=1:49 的比例配制铁标准(2μg/ml)，作 为铁标准工作液。4℃避光保存 3 个月有效。 2、制备样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存， 用于TIBC 的检测。选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥有塞子的试管或者一次性 无菌聚乙烯有盖子的离心管，加入血清或血浆 0.45ml、铁标准 (10μg/ml)0.25ml、 ddH2O 0.2ml，充分混匀，室温放置10min。加入铁吸附剂 50mg，混匀，室温放置 10min，期间振荡4 次，3000g 离心10min，取上清液，待用。 3、TIBC 检测 ：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥的试管或者一次性无菌聚乙烯的 离心管，按下表操作。 加入物(ml) 空白管 标准管 测定管 ddH2O 0.45 — — 铁标准(2μg/ml) — 0.45 — 上清液 — — 0.45 TIBC Assay buffer 1.2 1.2 1.2 混匀，于562nm 处，以空白管调零，读取测定管吸光度(即