[高等教育]分子生物学课件第20讲.pptVIP

二、 trp衰减子的作用机制 （一）trp mRNA的前导序列的结构（图8－23） （二）衰减子的作用机制 1，trp mRNA前导序列的二级结构（图8－24） 2， trp mRNA前导序列转录与翻译的时空关系 3，Trp对衰减子作用的影响（图8－25） （1）Trp存在时（图8－25，a） （2）Trp（或Arg）饥饿时（图8－25，b） （3）其他Aa（如Gly）饥饿时（图8－25，c） 4，Trp衰减子模型的实验证据 三、衰减子的普遍性及其生物学意义 1，普遍性 （1）结构共性 （2）作用机制共性 2，衰减子的作用机制可被看作是一种可阻遏的正调控 3，衰减子调控的生物学意义 （1）调控更为灵敏 （2）对代谢产物的反应更为直接 （3）调控更为精细 四、负责核苷酸合成的基因的衰减子 （一）天门冬氨酸转氨甲酰酶操纵元（pyr BI操纵元）前导序列结构 （二）pyr BI操纵元衰减子作用的机制（图8－26） 1， UTP含量较低时 2，UTP充足时 第七节 翻译水平的调控 一、反义RNA的调控作用 （一）micRNA （mRNA -interfering complementary RNA）及其作用位点 1，micRNA 2，micRNA的作用位点 3，反义RNA的作用方式 （1）与mRNA的核糖体结合位点结合，使翻译不能起始 （2）与mRNA结合形成双链结构，成为核酸内切酶的底物，从而使mRNA不稳定 （3）与转录物结合，使转录提前终止 （二）大肠杆菌外膜蛋白基因表达中micRNA的作用 1，渗透压对ompC，ompF基因表达的影响 2，micF RNA对ompF基因表达的调控 （三）λ噬菌体CⅡ蛋白对晚期基因表达调控的机制 1，PaQ及其转录产物 2，PaQ对Q基因表达的调控 （1）抑制Q基因mRNA的翻译 （2）由于PaQ的转录活性很高，可以抑制PR的转录，使Q基因的mRNA转录减少 （3） PaQ的作用的证据 （四）反义RNA的应用 1，研究应用 2，临床应用 二、mRNA二级结构对基因表达的影响 （一） mRNA二级结构对自身翻译的影响 1，单链噬菌体MS2家族噬菌体基因的表达产物（图8-29） （1） A基因：编码附着蛋白 （2）CP基因：编码衣壳蛋白 （3） rep基因：编码复制酶 （4）溶菌基因：裂解蛋白 2，R17噬菌体mRNA二级结构对翻译的影响 （1） R17正链RNA的特点 （2）基因的翻译的过程 （3） R17正链RNA复制过程中的二级结构对翻译的影响 A，R17正链RNA的复制 B， R17正链RNA的复制时A基因的翻译（图8-30） （二） mRNA二级结构对自身寿命的影响 1，影响mRNA降解速度的因素 （1）mRNA降解不是内切酶随机切割的结果 （2）核糖体对mRNA寿命无重要影响 （3）mRNA末端二级结构的作用 2，mRNA中二级结构对int基因寿命的影响 （1）溶菌周期的int基因表达产物 N蛋白的作用使RNA聚合酶转录出含int基因的产物L2 L2转录产物的结构（图8-31） sib位点 返回调控 （2）溶原周期的int基因表达 （3）从溶原生长向溶菌生长转变时int基因的表达 3，S12-引发酶-σ亚基操纵元mRNA二级结构对基因寿命的影响（图8-18） （1） S12-引发酶-σ亚基操纵元结构（P304） 转录产物的降解：先由RNA内切酶在引发酶和σ亚基之间切断，然后由外切酶从3‘末端发生降解 （2）引发酶部分mRNA的降解 降解最快 （3） S21基因和σ亚基编码区的mRNA的降解 均有发夹结构，较稳定 S21基因的mRNA还具衰减子结构，更为稳定 三、蛋白质合成的自体调控 控制自身mRNA的可翻译性的蛋白质：多数为核酸结合蛋白质，或是与核酸相互作用的蛋白质 1， RF2对自身mRNA翻译的控制 （1）RF2 mRNA结构 编码340个Aa 有两个ORF：ORF0（编码25个Aa，终止密码UGA）和ORF1（编码315个Aa，终止密码UAA） （2）RF2mRNA的翻译 RF2充足时：核糖体翻译完ORF1在UGA处肽链合成终止 RF2缺乏时：核糖体到达UGA时不能释放，发生一个碱基的移框，继续合成下游的315个Aa。RF1促进核糖体在UAA的释放 (3)移框窗口 必需保留15个核苷酸，才能保证30%以上的移框效率 窗口内部S－D序列对移框有重要作用 2，核糖体蛋白质合成的自体调控 （1） E coli基因表达机构的蛋白质及其基因的操纵元 A，蛋白质种类 有70余种：核糖体蛋白质（50多种），辅助蛋白质，RNA聚合酶的亚基和辅因子 B，操纵元数目：六个 C，操纵元中不同基因表达的差异性 核糖体蛋白质：绝大多数一个核糖体一个（L7／L12有4个） EF－Tu：每个细胞中是核糖体数的1