基因工程中的运载体质粒.ppt

基因工程中的运载体 运载体（Vector）： 一是用它作为运载工具，将目的基因转移到受体细胞中去；二是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量的复制。最终在受体细胞中表达大量目的基因产物，经分离纯化被人们利用。 常用的运载体： 质粒、噬菌体和动植物病毒两大类等 载体质粒应具备的四个条件 (1) 能在宿主细胞内稳定保存并自我复制。 标记基因存在的作用 1、“作为重组DNA载体的重要标记” 举例：大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。当人们用选择培养基，来培养受体细胞时，能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA，标记基因就起作用了。 2、“作为目的基因的细胞定位工具” 举例：通过将可定位检测的标记基因（只要已知其序列，既可针对设计标记探针，从而对其进行细胞定位）与目的基因进行连锁，当成功转化目的基因，该基因同时有成功表达后，既可间接对其进行定位；或者已知目的基因（该基因本身就处于某细胞中）周边序列，通过针对这些序列设计可插入标记基因，继而对该标记基因进行检测，也可间接对目的基因定位。 为什么基因工程需要运载体 原因如下： 1）使用适当的载体可以提高转导率； 2）载体上有报告基因,可以报告转导是否成功； 3）单独的目的基因片段如果没有能够重组进入受体细胞基因组（这种重组频率很低）,那么会被受体细胞识别降解； 4）载体具有能在受体细胞内稳定存在,并自主复制的能力,能保证目的基因在受体细胞内的复制. 质粒 标记基因，便于进行检测。 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　 (2) 有一个至多个限制酶切点，以便与外源基因连接 (3) 具有某些标记基因，以便进行筛选 （4）对受体细胞无害 例题.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D