分解尿素的细菌(上课)参考.pptVIP

思考：怎样证明以尿素为唯一氮源的培养基具有选择性？ 以尿素为 唯一氮源 的培养基 牛肉膏 蛋白胨 培养基 ?是 分离能分解尿素的细菌。 判断该 培养基 有无选 择性 实验组 对照组 培养基类型 是否 接种 ?目的 ?结果 只生长能分解尿素的细菌。 生长多种微生物 是 （一）筛选菌株1、选择培养基： 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 2、菌株： 纯且活状态所保存的菌种 。 培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 4、培养基选择分解尿素的微生物的原理 （二)统计菌落数目： 1.测定微生物数量的常用方法包括哪两种？ 2.平板划线法能不能用来测定微生物数量？ 3.稀释涂布平板划线法用来统计活菌数目的原理是什么？ 4.稀释涂布平板法用来统计活菌数目时，为了保证结果准确，有哪些注意事项？ 阅读与思考： 稀释涂布平板法和显微镜直接计数法 不能。平板划线法只能纯化微生物。 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 ①一般选择菌落数在 的平板上进行计数。 4.稀释涂布平板法用来统计菌落数目时，为了保证结果准确，有哪些注意事项？ 30—300 ②同一稀释度下，应涂布 平板作为重复组，并计算出菌落数的 。 至少三个 平均值 ③统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。因为 当 细胞连在一起时，平板上观察到的 。 低 两个或多个 只是一个菌落 ④利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 。 恰当的稀释度 实例分析P22 你认为哪个同学的结果更接近真实值？ 你认为这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如何改进？ 实例分析P22 第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。 第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了三个平板，但是其中1个平板的统计结果与其它2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能以这三个平板上菌落数的平均值作为统计结果。 已知某样品的稀释倍数为M，该稀释度下涂布平板上生长的平均菌落数为C，涂布时所用稀释液的体积为V，则每克样品中的菌株数等于多少？ 稀释涂布平板法的计算公式： 思考： 每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M 练一练： 一同学用稀释倍数为106的稀释液涂布平板，并计算出菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用的稀释液体积为0.2mL) 。 1.17×108 例2.某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别为2760、295和46，则该样品统计的菌落数(个/mL)约为（所用稀释液体积为0.1mL）： A．2.76×105 B．2.95×105 C．4.6×105 D．3.775×105 即学即练： D 一般选择菌落数在30—300的平板上进行计数。 知识点： 显微镜直接计数： 利用血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 不能区分死菌与活菌； 缺点 计数室 计数室分为 中格 每一中格又分为 小格 计数室是由___________个小格组成 25×16=400 放大 25 16 计数室的长和宽均为1mm，深度为0.1mm， 体积为1×10-4mL。 例：某同学操作时将1 mL酵母菌样品加99 mL无菌水稀释。如果观察到如图所示a、b、c、d、e 5个中格共80个小格内共有酵母菌48个，则上述1 mL酵母菌样品中约有酵母菌　　　　个；要获得较为准确的数值，减少误差，你认为该怎么做？　　　　。 显微镜直接计数： 2.4×108 多次计数， 求平均值 (3)(4)解答时要注意以下两点：①统一单位；②注意体积的变化。400个小室共容纳液体总体积为0.1 mm3，则80个小格容纳体积为：2×10－2 mm3，因1 mm3＝1.0×10－3 mL，故80个小格容纳的体积为2×10－5 mL，含酵母菌48个，又因酵母菌培养液总体积为100 mL，可设酵母菌总个数为x个，则有＝，解出：x＝2.4×108。 显微镜直接计数： 利用血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难