二细胞器的观察及临时制片.pptVIP

细胞生物学与医学遗传学学系制作 细胞生物学与医学遗传学学系制作 实验二 细胞器的观察及临时制片 前次实验报告存在问题小结！ 1、图画得偏小或布局不合理； 2、未找到典型细胞，形态失真； 3、点点拖尾或涂阴影，线条粗细不均； 4、结构标注不正确； 5、细胞名称未写对。 一、实验目的 1、观察永久制片中各种细胞器的光镜下形态； 2、学习和掌握临时制片的原理和方法。 二、实验内容 1、细胞器永久制片的观察 （1）高尔基复合体 猫脊神经节切片 （1）高尔基复合体 10X 40X （2）中心体 马蛔虫子宫受精卵细胞切片 10X 40X （1）原理 2、洋葱内表皮临时制片 ①TritonX-100，一种非离子去垢剂，能去除细胞内除细胞骨架蛋白以外的所有蛋白质。 ③考马斯亮兰，一种非特异性的蛋白质染料，能使蛋白染色。 ② M缓冲液，含有促进微丝肌动蛋白聚合的所需成分。 （2）操作步骤 撕取洋葱鳞茎内表皮 6mM磷酸缓冲液5分钟 1%tritonX-100 37℃ 2~3分钟 M缓冲液洗3次，5分钟/次 3%戊二醛固定10分钟 6mM磷酸缓冲液洗3次，8分钟/次 滴加0.2%考马斯亮兰染色15分钟 蒸馏水洗2~3次 装片观察 三、作业： 1、绘制示高尔基复合体和中心体的细胞图； 2、绘制微丝的镜下结构。 * 细胞生物学与医学遗传学学系制作 * 细胞生物学与医学遗传学学系制作 细胞生物学与医学遗传学