培养基的配制高压蒸汽灭菌操作.ppt

药学微生物基础教案 教学内容: 微生物人工培养技术 上课时间: 200 年 月 日 授 课 人: 任教班级: 级 班 课 时: 课 型:　新授课 教学媒体:　多媒体课件 教学目标： 1.理解微生物的营养需要及其繁殖条件. 2.理解灭菌原理及常用的灭菌方法,掌握高压蒸汽灭菌操作. 3.掌握微生物的人工培养几培养基配制. 教学重点： 1.培养基的配制 2.高压蒸汽灭菌操作. 3.细菌.真菌的生长繁殖. 教学难点： 1.培养基的配制 2.高压蒸汽灭菌操作. 第三章 微生物人工培养技术 第一节 理论基础 一、微生物的营养 （一）微生物细胞的化学组成 微生物细胞的化学组成,主要有水、蛋白质、核酸、脂类、维生素及微量元素。 （二）微生物的营养物质及其生理功能 1.碳源.2.氮源 3.无机盐 4.水 5.生长因子_是指微生物生长发育必不可少,需要量很 少,体内不能自身合成,需由外界提供才能生长的一类有机化合物。 二、微生物的生长 （一）细菌的生长繁殖 1．细菌的繁殖方式和速度 生物的繁殖方式分为有性繁殖和无性繁殖 　 细菌的繁殖方式是无性的分裂法。 细菌的分裂包括核分裂.细胞膜和壁形成以及子细胞分离三个过程。 2．细菌群体生长规律 生长曲线; 细菌的生长曲线能反映细菌群体的生长规律,生长曲线可分为四个时期; 迟缓期.指数生长期.稳定期及衰退期。 （1） 迟缓期 此期是细菌在新鲜培养液中适应环境和准备繁殖时期,是细菌的一个适应阶段。 特点: 分裂迟缓,菌体增大,代谢活跃。 （2）指数生长期 　　是细菌分裂繁殖最快的时期,细菌按几何级数增加。 特点: 代谢旺盛,生长迅速. 　　形态和生理特性较稳定.较典型,且对环境因子的作用较为敏感。 （3）稳定期 　　此期细菌的性状逐渐发生改变,繁殖数与死亡数几乎相等。 特点: 有益和有害的代谢产物都在积累。 细菌性状发生改变,芽胞开始产生。 （4）衰退期 　　细菌死亡数超过繁殖数,活菌数逐渐减少。 特点: 菌体出现变形,自溶等现象。 （二）真菌的生长繁殖 　　真菌的繁殖有有性繁殖和无性繁殖,主要靠繁殖器---孢子。 ? 1.丝状真菌的生长繁殖 （1）断裂繁殖 （2）无性孢子繁殖 无性繁殖是通过无性孢子来完成的。无性孢子是不经过两性细胞配合产生的孢子。 （3）有性孢子繁殖 经过两性细胞配合产生新个体的繁殖方式,可分为三个阶段: 质配 ,核配 ,减数分裂。 2．酵母菌的生长繁殖 　是单细胞真菌.常以出芽方式进行分裂繁殖成无性孢子。 （三）环境对微生物生长的影响 　1.营养物质 　是细菌生长繁殖的一个最基本的条件,也是前提条件。 三、灭菌原理 是通过相应的手段来抑制或消灭有害微生物 （一）物理因素 1.加热灭菌 高温能使菌体蛋白质、核酸、酶等发生变性,从而导致死亡,达到灭菌的效果。 　2.辐射灭菌 是利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法。 　　（1）紫外线 波长200-300nm的紫外线具杀菌作用，以265nm波长杀伤力最大。 （2）电离辐射杀菌原理 　　吸收射线的物体原子或分子 　 3．超声波 　　　超声波是频率超过200000HZ的高频声波，一般通过它来处理微生物悬液。当处理悬液时，由于超声波探头的高频振动，能使浮液内产生空穴，空穴内处于真空状态，只要悬液中的细菌进入空穴区，就会因压力差而裂解。 4．滤过除菌 　　　滤过除菌是用滤菌器阻留过滤液体和气体的细菌。滤器的除菌能力取决了滤板的孔径大小，一般为0.22-0.45μm ,常用于不耐热的血清,抗毒素,生物药品等的除菌。 5．高渗作用 　　大多数生物进入渗透压较高的溶液中时，细胞脱水，从而发生质壁分裂，微生物的生长受抑制甚至引起死亡。日常生活中高浓度的盐液（10%-50%）或糖液（50%-70%），使微生物处在高渗环境下产生质壁分离，生长受到抑制。此法可用来长期保存食物。 （二）化学物质 ? 1. 抗微生物剂 能杀死或抑制微生物生长的化学物质称抗微生物剂。 根据它们抗微生物的特性又可分为①抑菌剂 ②杀菌剂 ③溶菌剂。? 消毒剂和防腐剂 2．抗生素　　抗生素是生物在其生命活动过程中产生的一种次生代谢产物或其人工衍生物，它在低浓度时就能抑制或影响它种生物的生命活动。主要作用机制有以下几