动物模型在中药研究中的应用.docx

糖尿病及高血压动物模型的常用造模方法摘要 随着糖尿病和高血压的发病率日益增高，病患年龄趋于年轻化，这两种疾病已成为威胁人类健康的两大杀手。近年来针对这两种疾病的研究增多，且研究者创建的动物模型虽各有不同，但主要方法大同小异。现在对高血压及糖尿病的实验动物模型的造模方法进行总结。关键词 高血压 糖尿病 动物模型构建中药现代化在近些年发展迅速，也越发得到研究者的关注，中药有效成分的研究逐渐成为热点。对有效成分的研究，除了对有效单体化合物的分离研究之外，还有中药中各成分的药用活性的研究，这就需要用到大量实验动物来建造模型，研究有效成分的作用机理。现代中药药效研究很多是针对现有多发疾病，例如糖尿病、高血压等，针对这些疾病，研究者设计了很多方法，模拟疾病在人体发病的过程，探究药物对动物模型的作用效果。一、高血压模型高血压（hypertensive disease）是一种以动脉血压持续升高为主要表现的慢性疾病，常引起心、脑、肾等重要器官的病变并出现相应的后果，是最常见的心血管病，在全球范围内成为重大公共卫生问题。2004年的中国居民营养与健康现状调查结果显示，我国18岁及以上居民高血压患病率为18.8%，估计全国患病人数超过1.6亿。与1991年相比，患病率上升31%，患病人数增加约7 000多万人。对高血压的研究，根据发病机理不同，建立有遗传性高血压、神经源性高血压、应激性高血压、肾血管性高血压等的动物模型[1]。遗传性高血压的动物模型主要是突变系和转基因大鼠。GH(遗传性高血压大鼠)、SHR(自发性高血压大鼠)、SHRSP(易卒中自发性高血压大鼠)、DS(Dahl盐敏感大鼠)等属于突变系，其中应用最广泛的是突变系-SHR。SHR鼠群100%发生高血压，成鼠血压水平一般26.6 kPa且整个病程小于2 d[2-4]，既能节省实验时间，也有较好的重复性，个体差异较小。关于神经源性高血压的模型研究，张荣伟等[5]采用自身股静脉制成脉动血管植入延髓左侧Ⅸ，Ⅹ颅神经REZ区成功制造猫高血压模型，该模型可在短期内使血压升高，同时伴有心输出量的增加。取出脉动血管后2 h血压恢复到术前水平，适用于急性期动物实验。此后卢明等[6]采用狗耳后带蒂的动静脉肌膜瓣的动脉形成襻状植入到Ⅸ,Ⅹ神经根进入区( REZ )及延髓外侧，制成慢性神经源性高血压动物模型，此种模型术后10 d血压明显升高，解除压迫后10 d血压能回到正常水平，适用于长期观察和研究。肾血管性高血压为一侧或两侧肾动脉主干或分支狭窄、阻塞使肾血管流量减少导致肾缺血引起的高血压，为继发性高血压最常见的病因。高血压大鼠模型复制采用腹正中切口或左侧斜切口术式，成功/存活率95% 。王立文等[7]用二肾一夹法复制肾血管性高血压大鼠动物模型，不入腹，切口小( 1.5~2 cm)，成功/存活率100% 。亦有用神经外科手术时常用的普通 U 型银夹钳夹大鼠肾动脉,成功地制作了二肾二夹型肾血管性高血压模型。傅继华等[8]用易拉罐铝皮制作的圆型小环代替U型银夹,制作肾血管性高血压大鼠模型，此方法所用小环直径易控制、制备简单,且由于金属环无伸缩性，故可在狭窄肾动脉后，获得较恒定的肾动脉的血流量。此方法在一定程度上克服了U型银夹不易制作，其大小不易控制的缺点。二、糖尿病模型糖尿病分为一型糖尿病和二型糖尿病两种。Ⅰ型糖尿病是一种自体免疫疾病，患者的免疫系统对自身分泌胰岛素的胰脏B细胞作出攻击并杀死他们，结果胰脏并不能分泌足够的胰岛素。Ⅰ型糖尿病多发生于青少年，因胰岛素分泌缺乏，依赖外源性胰岛素补充以维持生命。Ⅱ型糖尿病有更强的遗传性和环境因素，并呈显著的异质性。目前认为发病原因是胰岛素抵抗（主要表现为高胰岛素血症，葡萄糖利用率降低）和胰岛素分泌不足的合并存在，其表现是不均一的，有的以胰岛素抵抗为主伴有胰岛素分泌不足，有的则是以胰岛素分泌不足伴有或不伴有胰岛素抵抗。Ⅱ型糖尿病是成人发病型糖尿病，多在35~40岁之后发病，占糖尿病患者90%以上。针对糖尿病的研究，多为Ⅱ型糖尿病，所建立的动物模型也是Ⅱ型糖尿病模型。一般采用高糖高脂饮食加链尿佐菌素( streptozotocin，STZ) 的方法诱导建Ⅱ型糖尿病( T2DM)动物模型。STZ对胰岛β细胞具有高度选择性的毒性作用，进而引发实验性糖尿病。然而，单纯以这种方式所诱发的模型只符合Ⅰ型糖尿病特征，与Ⅱ型糖尿病的病理特征和临床特点相差较大。有研究表明，高脂饲料喂养可以引起大鼠广泛的胰岛素抵抗，虽不致于使血糖明显的升高，却可以在同时进行小剂量注射STZ造成的胰岛β细胞轻度损伤的情况下，使多数动物产生糖耐量异常，再喂以高糖饲料引起动物肥胖[9]，也可以复制出2型糖尿病的大鼠模型。方法是选择至少 15 只实验动物随机分为 2 组，实验组饲喂高糖高脂饲料，正常组饲喂普通饲料。喂