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细胞工程项目申请书 生物工程:也称生物工艺学(biotechnologyorbioprocess),一般称为生物技术。一般意义上讲,生物工程是以生命科学为基础,利用生物体系和工程学原理生产生物产品和创造新物种的一门综合技术。换言之,就是利用生物有机体(从微生物直至高等动物)或其组成部分(器官、组织、细胞等)发展新工艺或制造新产品的一种科学技术。 细胞工程:应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获取新型生物或特种细胞产品的一门科学技术。 第二章细胞工程基础 1.细胞分化(celldifferentiation)的概念 同型的胚胎细胞,在细胞分裂、发育过程中,形态结构、生化组成、生理过程上产生专一性和特异性的现象,称细胞分化。是细胞功能和形态逐渐转化、产生稳定组织差异的过程。 2.细胞分化的分子基础是细胞决定(determination) 细胞的分化可被识别之前,细胞沿着特定方向变化的能力已经被提前赋予了,这种现象称细胞决定。是细胞分化潜能逐渐受限的过程。分化的本质:细胞按照一定的时空顺序差异基因表达(differentialgeneexpress)。如奢侈基因(luxurygene),持家基因(house-keepinggene)。 3、影响细胞分化的因素 (1)胞外信号分子的诱导作用(一部分细胞对周围细胞的分化诱导):如成纤维细胞生长因子(FGF)、转化生长因子(TGF)。 (2)激素的诱导: (3)细胞质的不均一性:如卵和受精卵。 (4)“位置效应”:细胞在组织和机体内的位置影响其分化。 (5)外部环境条件对分化的影响:如早期胚胎中,胚胎表面的细胞→滋养外胚层,内部的细胞→内细胞团(将形成胚胎)。如动物卵细胞未经排卵而被激活,将在卵巢中异位发育成畸胎瘤。 细胞分化的时空性 时间上的分化:指一个细胞在不同的发育阶段上可以有不同的形态和机能,不同的发育时间细胞之间的区别。 空间上的分化:指处于不同空间位置中的同一种细胞后代之间出现的差异。 单细胞生物仅有时间上的分化,如噬菌体的溶菌型和溶原型。 多细胞生物的细胞不但有时间上的分化,而且由于在同一个体上的各个细胞所处的位置不同,因而发生机能上的分工,于是又有空间上的分化,如一个植物个体在其顶端、根、茎、叶等不同部位具有不同的细胞。 4.细胞分化潜能:细胞分化能力的强弱称为发育潜能。 5.植物细胞的分化潜能:植物细胞在发 育潜能上,高度分化的植物营养组织仍保持着发育成完整植株的能力,即具有全能性。 6.细胞分化潜能逐渐变窄 7.全能细胞(totipotentcell):单个细胞在一定条件下分化发育成为完整个体的潜能称为细胞的全能性。 8.多能细胞(pluripotentcell):虽然局限,但仍有发育成多种表型细胞的能力,这种细胞称为多能细胞。 9.单能细胞(unipotentcell):形态上、功能上专一化的终末分化细胞,被称为单能细胞。 10.生物的每一个细胞经过分裂和分化后,仍然保持发育成完整个体的潜在能力,这种特性称细胞的全能性。 原因:细胞具有这种潜能是因为每个细胞都包含了这个物种的所特有的全套遗传物质,具有发育成为完整个体所必需的全部基因。细胞的全能性为开展细胞工程研究提供了广阔空间。 11.细胞表现出全能性的条件:离体状态、具有一定营养物质、激素和其他外界条件 12.细胞周期:细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分完成所经历的一个有序过程。其间细胞遗传物质和其他内含物分配给子细胞。 13.细胞周期时相组成: 14.无丝分裂(amitosis):又称直接分裂,由Remark(1841)发现于鸡胚血细胞,不涉及纺锤体形成及染色体变化。胞核拉长,核中间断裂,胞质一分为二。低等动物、植物胚乳发育、动物上皮组织、疏松结缔组织、肌肉组织、肝细胞有无丝分裂。优势:分裂快、能耗少、分裂中细胞功能继续发挥——利于细胞对外界环境变化作出迅速反应。缺陷:遗传物质不能有效均等分配。 有丝分裂(mitosis):又称为间接分裂,由Fleming(1882)年首次发现于动物,Strasburger(1880)发现于植物。减数分裂(meiosis):染色体复制一次,细胞连续分裂两次。是发生于有性生殖个体生殖细胞的一种特殊的有丝分裂方式。 15.间期:完成组成染色体的DNA分子的复制和有关蛋白质的合成。 前期:出现染色体、核膜解体、核仁消失、形成纺垂体。 中期:染色体排列到赤道面上。 后期:姐妹染色体单体分开并移向两极的时期。 期末:从子染色体到达两极,至形成两个新细胞为止。 16.减数分裂染色体经过复制一次后,要经过两次分裂,形成四个细胞,结果子细胞的染色体数目比亲代细胞减少了一半。 第三章植物组织与细胞培养 1.