无菌操作技术教学方案精品.docVIP

河南农业职业学院教案 系别：植物科学系 主讲教师：李庆伟 课题 外植体无菌操作技术 授课方式 课堂教学 学时 1学时 授课时间 5月17日 5月17日 5月18日 5月18日 授课班级 园艺 植保 农艺 园林 教学目标 知识目标：掌握无菌操作技术基本知识 技能目标：能够掌握植物组织培养的无菌操作技术 素质目标：培养学生探究、协作学习的能力。 重点难点 无菌操作步骤的具体剖析是本节课的重点，同时又是难点。 教学方法 模拟实验教学法、多媒体演示情景法、讨论探究法、引导启发法。 学习方法 观察 练习 思考 熟练掌握的循序渐进的教学方法 教学用具 自制录像片段、试管苗、培养基、接种工具（手术剪、手术刀、枪状镊、载物架）、无菌纸、酒精灯、酒精瓶、数码相机或笔记本、三脚架、数据线。 教学过程： 新课导入（约2min）： 提出问题、引导学生，积极思考 教师：上次课我们学习了培养基的配制，在培养基配制好以后，应该进行什么步骤呢？ （停顿5秒）我手中这两个瓶子里面有什么不同？ 为什么不同呢？中间缺少什么环节？那就是我们今天的新课外植体无菌操作技术，首先请先看一个短片。 讲授新课（约40min） 创设情景、设置问题、讨论探究 短片播放： (约7min) 在短片播放同时， 教师整理讲桌，将所需物品、器械放置其上，并打开三脚架和数码相机，等播放结束后连接电视。 模拟实验：(约12min) 讲述实验步骤，对技术进行操作 教师：同学们,现在我们开始在教室中进行刚才录像里面进行的操作,这个讲桌就是超净工作台。我在上面操作,整个过程通过数码相机可以再电视中进行直播, 我操作结束,请个别同学们上来操作。 1 对接种室环境进行消毒(喷消毒剂),打开超净工作台风机和紫外灯（图1、图2），以及接种室紫外灯。 说明：打开紫外灯后立即从接种室出来，防止紫外线对人造成伤害。 2、洗手，穿实验服，戴帽子、口罩等（图3） 说明：在超净工作台工作同时，操作人员用在自来水下用肥皂洗手，让后在缓冲室穿实验服，戴口罩和帽子，换拖鞋。 3、30min后关接种室及超净工作台紫外灯（图4），并打开超净工作台照明灯。（图5） 4、用酒精擦拭双手（图6）和超净工作台台面。（图7） 说明：用酒精喷壶对双手喷撒酒精；在擦拭工作台时要全面擦拭。 5、点燃酒精灯（图8），灼烧接种工具。（图9、图10） 说明：等超净工作台上酒精干了，点燃酒精灯；酒精灯从里向外点燃；先灼烧载物架，仔细灼烧，要消毒彻底；然后烧镊子，剪子等接种工具，灼烧剪子时，要两面都要灼烧。 6、用灼烧过的镊子取出无菌纸置于酒精灯和接种工具之间。（图11、图12、图13） 说明:物品在超净工作台上所示如图11（绘于黑板上），从一端打开无菌纸，用镊子从中夹出一定数量的无菌纸（图12），置于超净工作台上（图13）。 7、打开试管苗封口（图14），取出苗置于无菌纸上。（图15、图16） 8、一手持镊子,一手持剪子,将苗剪成1—2厘米长含有芽的茎段.（图17.图18.图19） 9、打开培养基瓶口，在酒精灯上轻轻灼烧一周，一手持镊子挟起剪好的试管苗茎段，正段向上插入培养基中，每瓶接种3至4个，接种后封瓶口。（图20、图21、图22） 10、接种2-3瓶，待接种材料用完后，将使用过的无菌纸取出。整个操作结束后，整理台面（图23），并做好标记。 说明 ：每张无菌纸只使用一次，使用过后，用消过毒镊子夹出放在一旁。台面整理后如图23。 学生操作：（图24、图25）（约15min） 教师：现在请同学上来操作，其它同学通过电视看学整个操作过程，等这个同学操作结束，请其它同学指出其中存在的错误和不足之处，并说出解决措施。我对同学们没有发现的问题指出来，并对每个同学的操作进行总结。（约6 min） 课堂小结 同学们，今天我们学习的是外植体的无菌操作技术，希望大家能够理解每一步的操作，并掌握这门技能，在下次作实验时我们考核。 课 后 作 业 (约3 min) 请学生观察几张照片，根据照片情况写出“不同继代培养材料的继代切分方法”，分组完成，合作查阅相关资料，写200—300字，文字精炼，意图明确。 参考资料 王清连主编《植物组织培养》，中国农业出版社。 李俊明编译《植物组织培养教程》，中国农业大学出版社。 教学反思 如果能够结合课堂讲授，让同学们能够及时操作，对本节课的内容会有更好地理解和掌握。