正交设计多糖提取实验方案精品.docVIP

多糖 正交实验方案 基本提取工艺流程： 黄精、百合干燥粉碎——石油醚脱脂2次——加水热提——提取液过滤——水浴浓缩——离心取上清——加入Sevag试剂脱蛋白操作——取上层水层——加无水乙醇沉淀——收集沉淀——用水溶解——过滤除杂质——重复1次醇沉——收集沉淀——加水溶解定容——成为贮备液。 精密量取贮备液——加水稀释定容——供测多糖含量。 精密量取贮备液——置锥形瓶水浴蒸干——干燥3h——冷却后——称重，计算浸膏得率。 一、提取过程的正交方案： 1、称取黄精、百合各10g干燥至恒重——粉碎成粗粉（过筛）——（置于圆底烧瓶中）加入5倍量（100ml）石油醚——水浴50℃加热回流1h，共2次，进行脱脂及除去小分子糖——弃液留渣，药渣晾干（置于培养皿中于通风处过夜晾干，或置于圆底烧瓶中水浴上加热至能轻松倒出）——（按照正交设计表的要求）加适量蒸馏水，于适宜温度，水浴加热回流提取规定次数——合并提取液—减压抽滤——水浴——浓缩（90℃）——至固定量30ml（浓缩过量时补足体积）——4000r/min离心10min——（注射器抽取）取上清液 2、——置于锥形瓶中——加入Sevag试剂（氯仿：正丁醇=5:1）约等量——置于恒温水浴振荡器50℃振荡15min——改置于分液漏斗中静置20min以上——待其分层后，取最上层（从上口倒出） ——重复操作2次——置于广口瓶，加醇处理，加入4倍量的无水乙醇（预冷过）——冰箱冷藏过夜使其沉淀——减压抽滤，收集沉淀——（连同滤纸一起）用20ml蒸馏水溶解——过滤除去水不溶物——重复1次加醇沉淀，减压抽滤——收集沉淀，加少量蒸馏水溶解，加水稀释——定容至50ml容量瓶中，成为贮备液。 3、精密量取1ml贮备液，加至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，定容摇匀。供测定多糖含量。 4、精密量取10ml贮备液，置于（已干燥并精密称重的）小锥形瓶中，水浴蒸干，于105℃烘箱干燥3h，取出迅速置于玻璃干燥器内冷却30min，迅速称重，计算浸膏得率。 浸膏得率=（干浸膏重量/药材质量)×（50/10) x 100% 注意事项： 1、粉碎不用太细，20-40目均可。脱脂时圆底烧瓶可选择500ml或1000ml的。 2、9份水浴浓缩条件应一致，置于水浴锅盖面上，注意不要打翻。 3、离心后取上清液时，用注射器抽吸，每编号用一支。 4、精密量取操作，用移液器或移液管 5、制备浸膏的小锥形瓶，约50ml规格的。应洁净，105℃干燥2-3h至恒重，迅速取出，置于玻璃干燥器内冷却30min后，带手套操作，迅速称量，记录空瓶重量。 6、加醇沉淀时，应置于磁力搅拌器上，在搅拌下缓慢加入无水乙醇。在抽滤时再取回搅拌子。 多糖提取正交因素表 水平 温度 （℃） 提取时间 h 料液比 提取次数 1 70 1 1:8 1 2 80 1.5 1:10 2 3 90 2 1:12 3 多糖提取正交试验表 编号 A 提取温度 ℃ B 提取时间 h C 料液比 V：V D 提取次数 多糖浸膏 % 多糖含量 % 1 70 1 1:8 1 2 70 1.5 1:10 2 3 70 2 1:12 3 4 80 1 1:10 3 5 80 1.5 1:12 1 6 80 2 1:8 2 7 90 1 1:12 2 8 90 1.5 1:8 3 9 90 2 1:10 1 k1 k2 k3 R 三、多糖脱蛋白及醇沉正交试验方案 下面是赠送的合同范本，不需要的可以编辑删除！！！！！！ 　教育机构劳动合同范本 为大家整理提供，希望对大家有一定帮助。 　　一、_________ 培训学校聘请_________ 籍_________ (外文姓名)_________ (中文姓名)先生/女士/小姐为_________ 语教师，双方本着友好合作精神，自愿签订本合同并保证认真履行合同中约定的各项义务。 　　二、合同期自_________ 年_________ 月_________ 日起_________ 年_________ 月_________ 日止。 　　三、受聘方的工作任务(另附件1 ) 　　四、受聘方的薪金按小时计，全部以人民币支付。 　　五、社会保险和福利： 　　1.聘方向受聘方提供意外保险。(另附2 ) 　　2.每年聘方向受聘期满的教师提供一张_________ 至_________ 的来回机票(金额不超过人民币_________ 元整)或教师凭机票报销_________ 元人民币。 　　六、聘方的义务： 　　1.向受聘方介绍中国有关法律、法规和聘方有关工作制度以及有关外国专家的管理规定。