(精选)【抗生素精品课件】抗生素微生物检定法教学课件.pptVIP

第五模块 生物检测技术;;复习提问;新课大纲;一、概 述; 是指当标准品和供试品属于同一性质的抗生素时，标准品溶液和供试品溶液对一定试验菌所得的剂量反应曲线，在一定剂量范围内相互平行。即“同种物质，同种反应”，因此每种抗生素有着各自的效价单位，不同抗生素之间的效价单位没有可比性。;3.方法分类:; ①管碟法又称管碟琼脂扩散法 是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品二者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。在一定范围内，抗生素溶液的对数浓度（剂量）与抑菌圈面积或直径成正比，根据抑菌圈的大小计算出抗生素溶液的浓度。 ; 指抗生素药物的作用强度。 用单位“IU”作为其有效成分的一总衡量尺度。 目前，抗生素的剂量原则上以纯品的重量表示，并加注单位。如土霉素0．25克（250000单位） 即1毫克=1000单位 ； 个别品种仍以习惯沿用，如青霉素仍用单位表示剂量。;;;;T2; 扩散现象：由球面扩散动力学公式表示　 相当于直线方程：y=bX+c 抗生素总量的对数值与所形成抑菌圈直径的大小呈直线关系，来测定抗生素抗菌活性。 ; 　　　　　 　　　　　　 　　　;抑菌圈（抗生素效价）自动测量分析仪;③菌 悬液 的制 备;类别;水 1000ml;磷酸盐缓冲液（ PH 6.0）取磷酸氢 二钾 2g 与磷酸二氢钾 8 g，加水使成 1000 ml，滤过，在115oC灭菌30分钟，即得。 磷酸盐缓冲液（pH7.8）取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使成1000ml，滤过，在 115 oC灭菌 3 0分钟，即得。;枯草芽抱杆菌悬液　　取枯草芽抱杆菌（63501）的普通琼脂斜面培养物，接种于盛有普通琼脂斜面培养基的培养瓶中，在35－37oC培养7日，用革兰氏染色法涂片镜检，应有芽孢85％以上。用灭菌水将芽孢洗下，在65oC加热30分钟，即得。 短小芽抱杆菌悬液　　取短小芽抱杆菌（63202）的普通琼脂料 面培养物，照上述方法制备，即得。;　　 标准品的使用和保存，应照标准品说明书的规定。临用时照附表的规定进行稀释。 精密称（或量）取供试品适量，用各该药品项下规定的溶剂溶解后，再按估计效价或标示量照附表的规???稀释至与标准品相当的浓度。; 　取内径90mm、高16—17mm的平底双碟，分别注入加热融化的培养基20ml，使在碟底内均匀摊布，放置水平台上使凝固，作为底层。 另取培养基适量加热融化后，放冷至48－50oC（芽孢可至60℃），加入规定的试验菌悬液适量（能得清晰的抑菌圈为度。二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径在 18－24 mm。 ; 二剂量法取照上述方法制备的双碟不得少于4个，在每1双碟中对角的2个不锈钢小管中分别滴装高浓度及低浓度的标准品溶液，其余2个小管中分别滴装相应的高低两种浓度的供试品溶液，高、低浓度的剂距为2：1或4：1。在规定条件下培养后，测量各个抑菌圈直径（或面积）。; ;S2=高浓度标准品溶液所致的各抑菌圈直径的总和， S1=低浓度标准品溶液所致的各抑菌圈直径的总和， T2=高浓度供试品溶液所致的各抑菌圈直径的总和， T1=低浓度供试品溶液所致的各抑菌圈直径的总和。 I=高浓度与低浓度比值的对数。 将此百分数乘以供试品估计效价的毫克单位数，即得供试品每 lmg中所含的单位数。;5.应用示例; ;本课小结;课后习题;Thank you!