二磷酸甘油(BPG)对血红蛋白与氧结合的影响: H+,CO2促进O2的释放 不同pH条件下血红蛋白的氧饱和曲线 蛋白质的两性电离,等电点:当溶液在某一特定的pH时,使蛋白质所带的正电荷与负电荷恰好相等,即净电荷为零,这时溶液的pH称为该蛋白质的等电点。 蛋白质的变性与复性 变性:蛋白质受某学物理的或化学的因素的影响,分子三维结构被破坏,从而导致其理化性质,生物学活性改变的现象。 变性作用的实质是蛋白质分子中的次级键被破坏,二级结构以上的高级结构被破坏。但变性不涉及共价键的破裂,即蛋白质的一级结构保持完整。 五、蛋白质的性质 变性过程中蛋白质的变化: 生物活性丧失 侧链基团暴露 一些物理化学性质的改变 生物化学性质的改变 复性:当某些变性因素去除后,变性蛋白又可以重新回复到天然构象,这一现象称为蛋白质的复性。变性蛋白能否复性,取决于蛋白质变性的 因素、蛋白质的种类以及蛋白质分子结构改变的程度。 蛋白质的光学特性:蛋白质分子中含有的Tyr,Trp和Phe等氨基酸残基,具有紫外吸收特性。蛋白质分子的紫外吸收峰在280nm处,这个性质可应用于蛋白质的浓度测定。 1. 蛋白质分离纯化的一般原则 材料预处理及细胞破碎:机械破碎法,渗透破碎法,反复冻融法,超声波法,酶法。 蛋白质粗制品的获得:根据所需蛋白质的性质,选择合适的方法将所要提取的蛋白质与其他成分进行初步地分离。等点点沉淀,盐析法
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