环境和生物样品的准确测定及成像.docVIP

自然科学奖公示 项目名称： 环境和生物样品的准确测定及成像 主要完成人： 钟鸿英、李海兵、冯国强、徐晖、梁沛 完成单位： 华中师范大学 推荐单位： 华中师范大学 项目简介： 本项目属于化学一级学科、分析化学二级学科，由国家自然科学基金、科技部863计划、湖北省自然科学基金重点项目以及武汉市晨光计划资助，旨在建立生物和环境样品的选择性准确测定及成像方法，并分析环境因素影响下生物体内蛋白质表达、翻译后修饰及代谢的变化。本项目建立的分析技术对监测环境中持久性有机污染物、重金属离子以及食品中违禁化学物等的迁移和转化、揭示环境因素对生物体健康影响具有重要意义。 建立了蛋白质多位点磷酸化修饰的选择性富集、分离和质谱结构鉴定新技术。In vivo 翻译后多位点磷酸化修饰在调控活性梯度依赖性离子门控和蛋白质相互作用中具有重要意义，然而多位点磷酸化蛋白不仅在细胞中的丰度低、动态可逆，而且其携带的负电荷给质谱检测带来很大困难。针对环境暴露和疾病风险评估模式生物斑马鱼的卵细胞，本项目研究了尖晶石和反尖晶石磁性纳米颗粒表面八面体位过渡金属离子的配位性质，建立了单磷酸化和多磷酸化肽的选择性分离富集技术，利用基质辅助激光解析离解软电离方法实现了质谱的高分辨、高准确鉴定，相关论文发表在Nature Communications。斑马鱼卵黄蛋白被认为是水环境中类雌性激素化学物的暴露标志物，本项目检测发现斑马鱼卵黄蛋白具有高度磷酸化结构特点。 建立了蛋白质脂修饰的化学衍生、同步稳定同位素标记、超声辅助液液萃取富集以及质谱定量分析新技术。In vivo 翻译后脂修饰在蛋白质转运、膜锚定和信号转导中起着重要作用，然而这种修饰大多发生在膜蛋白，其低丰度和溶解度差等特点使这类翻译后修饰的研究远远滞后于其他修饰。针对外源性化学物的主要代谢器官肝脏，本项目研究了与蛋白质共价结合长链脂质的化学水解和甲酯化反应条件，利用超声辅助液液萃取，实现了低丰度脂质的富集，并建立了同步稳定同位素标记，实现了蛋白质脂修饰的质谱定量测定，相关研究论文发表在Analytical Chemistry，随后以详细操作规程和标准分析方法形式发表在Nature Protocols。当斑马鱼长期暴露在含有机氯的水环境中，本项目检测发现其肝脏蛋白的脂修饰发生明显改变，并实现了有机氯污染物在肝脏中代谢产物的富集和检测。 建立了选择性分子识别、分离和定量分析新技术。针对复杂环境和生物样品，本项目研究了一系列基于纳米孔、量子点等的新型选择性分子识别方法，以及萃取富集、顶空进样等分析技术，建立了具有高灵敏和选择性的荧光分析法、原子光谱法和高效液相色谱法，相关研究论文发表在J American Chemical Society, Chemistry of Materials, J Chromatography A, Talanta等。 建立了高分辨、高灵敏分子成像新技术。针对痕量样品分子的原位测定，本项目研究了一系列质谱和荧光光谱分子成像方法，建立了基于新型光电子俘获软电离原理的质谱成像基础理论和实验技术，设计合成了具有高灵敏度和选择性的荧光探针分子，相关研究成果发表于Analytical Chemistry, Chemical Communications。 代表性论文专著目录： 序号 论文名称/刊名/作者 年、卷、页码 1 Mass spectrometric analysis of mono- and multi-phosphopeptides by selective binding with NiZnFe2O4 magnetic nanoparticles / NATURE COMMUNICATIONS / Zhong, HY (Zhong, Hongying); Xiao, X (Xiao, Xiao); Zheng, S (Zheng, Shi); Zhang, WY (Zhang, Wenyang); Ding, MJ (Ding, Mengjie); Jiang, HY (Jiang, Haiying); Huang, LL (Huang, Lulu); Kang, J (Kang, Jie) 2013、4、1656 2 Comparative analysis of S-fatty acylation of gel-separated proteins by stable isotope-coded fatty acid transmethylation and mass spectrometry/ NATURE PROTOCOLS / Dong, LJ (Dong, Linjie); Li, JJ (Li, Jianjian); Li, L (Li, Lun); Li,