乳腺癌MCF-7细胞体外干细胞培养条件下雌激素受体表达与治疗敏感性初探.pdfVIP

· 36 · 中华乳腺病杂志(电子版)2012年4月第6卷第2期 ChinJBreastDis(ElectmnicEdition)，April2012，Vo1．6No．2 唏孑 u 论 著 · 腺癌 MCF一7细胞体外干细胞培养条件下雌激素 受体表达与治疗敏感性初探 张斌 张霞 张改容 刘越坚 张阳 【摘要】 目的 通过比较观察激素敏感的MCF一7细胞在体外干细胞培养和常规培养条件下雌激 素受体 (ER)变化及对内分泌治疗药物的敏感性变化，初步探讨肿瘤干细胞与内分泌耐药的关系。方 法 分别于常规培养及干细胞培养条件下 (悬浮球培养)培养激素敏感的MCF一7细胞株，流式细胞仪检 测分子表型CD44CD24 与CD44CD24亚群细胞比例变化，免疫细胞化学法测定ERa和ERB的表 达变化，MTF法检测细胞对他莫西芬的敏感程度。分别 以t检验、卡方检验、方差分析进行统计分析。 结果 干细胞培养条件下 CD44CD24 亚群细胞的 比例为 (1_60±0．08)％，比常规培养条件下 的 (0．27+0．08)％显著增加 (t：一12．10，P=0．00)，而 CIM4CD24亚群细胞 比例 由(5．59±0．88)％增至 (30．63+4．40)％(t=一5．58，P=0．00)。干细胞培养条件培养下ERoL和ERI3表达率较常规培养下调，分 别由85．27％和90．53％降至69．43％和73．20％，差异有统计学意义 (X2=214．64，P=0．00；x 303．58， P=0．00)，且对他莫西芬的敏感性降低 ，Ic∞值由(9．82±0．31)p．mol／L升至(16．46±0．50)p,mol／L，再 次诱导分化后ER并未出现上调，对他莫西芬的敏感性仍旧降低(F=l13．63，P：0．00)。结论 与常规 培养相比较 ，体外干细胞培养条件下可以培养出含高比例具有干细胞特性的CD44CD24 与CD44 CD24亚群细胞的微球囊 ，其ER仍为阳性表达，但对他莫昔芬治疗敏感性减低，推测其可能是乳腺癌 内 分泌耐药的原因。 【关键词】 乳腺肿瘤；干细胞；雌激素受体 ；雌激素受体p；CD44CD24 细胞 【中图法分类号1 R737．9 【文献标识码】 A Expressionofestrogen receptorand sensitivityto endocrine therapy ofM CF-7 human breastcancer cellsculturedinstem cellcultureinvitro ZHANGBin，ZHANGXia，ZHANGGai—rong，LIUYueqian， ZHANGYang．SecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity，Dalian116027，China Correspondingauthor：ZHANGYang，E—mail：zydl@medmail．con．cn A【bstract】 Objective Toexploreestrogenreceptor(ER)expressionandendocrineresistanceof hormone—sensitiveMCF-7cellsinnomr alcultureorinstem cellcultureinvitro．M ethods TheMCF一7cells wereculturedinnomralcultureorinstemcellcultureinvitro(suspensionsphere)．TheproportionofCD44 CD24 phenotypeandCD44CD24 phenotypecellsweredetemrinedusingflowcytometry(FCM)．TheERa andER3[expressionwasdetectedusingimmunohistochemicalmethod．Thesusceptibilitytotamoxifenwas determinedusingMTIessay．Thedatawereprocessedwitht-test，Chi—squaretestand analysisofvariance， respectively．Results Insuspe