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鸡传染性支气管炎活疫苗（H120株）生产岗位操作规则 贺永佳 鸡传染性支气管炎的介绍 病原 鸡传染性支气管炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属的代表种。单股RNA。有囊膜，其上有纤突。病毒主要存在于病鸡呼吸道渗出物中。病毒能在10－11日龄鸡胚中生长。感染鸡胚出现的特征性变化是：发育受阻，胚体缩成小丸形，羊膜增厚，紧贴胚体，卵黄囊缩小。感染鸡胚尿囊液不能凝集鸡红细胞，但经1％的胰酶处理或磷酸酯酶C处理后，具有血凝性。 流行特征 自然感染仅见于鸡、雉，各种年龄鸡均可发病，以雏鸡发病最严重。主要经呼吸道传播，也可经消化道传播。四季均可发病，以冬季最为严重。气候突变、寒冷、拥挤、通风不良或应激等可诱发本病。 临床特征 呼吸型传支发病急，传播快，发病率高，几天内可迅速波及全群，若无继发感染，鲜见死亡。 呼吸困难，伸颈张口呼吸 母鸡产蛋率急剧下降，恢复期出现畸形蛋 蛋壳变白、变软、变砂 蛋白稀薄如水 但饮水量明显增加，采食 量下降，畏寒挤堆 随后病鸡排出白色水样粪便 病理变化 1、 呼吸型传支 气管黏膜充血、出血 慢性病例气管内有浆液性或黄白色干酪样渗出物，下部多见 产蛋母鸡卵巢变形，卵泡充血、出血、液化 卵巢、输卵管萎缩 肾脏有大量尿酸盐沉积、苍白、肿胀 肾脏呈花斑状（珍珠鸡） 腺胃肿大 乳头界限不清 实验室鉴别诊断 鸡胚接种实验鉴别诊断 取9～11日龄SPF鸡胚，尿囊腔接种处理病料悬液，接种后4～5天，可见胎儿发育迟缓、卷曲。 HA试验采取微量凝集试验。选用96孔血凝板，1％鸡红细胞，取接种鸡胚尿囊液检测，无血凝性。但在用1％胰蛋白酶或磷酸酯酶C处理尿囊液24小时后，发生血凝。 鉴别诊断要点 该病易与新城疫、传染性喉气管炎相混淆。 鉴别诊断要点有： 传染性支气管炎是所有呼吸道传染病中传播最为迅速的一种疾病，潜伏期短，无前驱症状，突然出现呼吸症状，并很快波及全群。 传染性支气管炎常见肾脏肿大，呈“花斑肾”，而新城疫和传染性喉气管炎则无，传染性喉气管炎常见鸡咯血，而前两者则无。 三者接种鸡胚后所呈现的鸡胚病变不一样。传染病支气管炎可出现休儒胚、蜷缩胚，72小时内死亡数量少；新城疫则出现全身出血，鸡胚多数在72小时内死亡；传染性喉气管炎则是在鸡胚绒毛尿囊膜上出现清晰可见的痘斑。 病毒的血凝性差异。新城疫病毒能够凝集鸡红细胞，传染性支气管炎病毒需经胰酶处理后才表现血凝性，而传染性喉气管炎则无血凝性。 传染性支气管炎无神经症状，而新城疫常可见神经症状。 正文 鸡胚孵化 生产用毒种制备 半成品的制备 疫苗的配制 疫苗的分装 疫苗的冻干 轧盖、贴签 鸡胚孵化 （一） 孵化前的准备 1 、孵化器 ⑴、消毒 若采用全进全出式的孵化器，在前后两批孵化间隔先用2—5%的84消毒液全面擦拭消毒，再用甲醛、高锰酸钾熏蒸消毒。若采用连续式孵化器，要随时检查，一经发现有破蛋污染及时挑出，并用2%~5%的84消毒液擦拭消毒。 ⑵、孵化器维护 定期检修，发现故障及时修理，保证正常运行，使其温度、湿度分别稳定于38.0℃~38.5℃和55%~70%。 ⑶、检查水盘 每天定期检查水盘中水的质量，定期刷洗，保证清洁。 ⑷、检查进、排气孔，根据需要，调整到适当的位置。 2、蛋盘 要准备足够的孵化用蛋盘，用水清洗干净，并用0.1%苯 扎溴铵溶液消毒或用甲醛熏蒸消毒，备用。 3、种蛋 ⑴、制造活疫苗用SPF种蛋。 ⑵、根据生产计划领取种蛋，挑选出合格种蛋，剔除畸形蛋、裂纹蛋、破壳蛋。 4、批号 对每批孵化的种蛋都要确定孵化批号，并填写《种蛋孵化工序记录表》。 生产用毒种制备 一、条件准备 1 根据要制备毒种所需物料及设备条件，进行全面准备。 2 按使用时间，将准备好的各种物品提前移入洁净工作间待用。 3 在工作开始前30～40min，打开洁净工作间的净化系统。 半成品的制备 疫苗的配制 疫苗的分装 疫苗的冻干 冷冻干燥的程序是这样的：在冻干之前，把需要冻干的产品分装在合适的容器内，一般是玻璃或安瓿装量要均匀，蒸发表面尽量大而厚度尽量薄些；然后放入与冻干箱尺寸相适应的金属盘内，装箱之前，先将冻干箱进行空箱降温，然后将产品放入冻干箱内进行预冻，抽真空之前要根据冷凝器冷冻机的降温速度提前使冷凝器工作，抽真空时冷凝器应达到-40℃左右的温度，待真空达到一定数值后（通常应达到100μmHg以上的真空度），即可对箱内产品进行加热。一般加热分两步进行，第一步加温不使产品的温度超过共熔点的温度；待产品内水份基本干燥完后进行第二步加温，这时可迅速地使产品上升的规定的最高温度。在最高温度保持数小时后，即可结束冻干。 轧盖 贴签 贴签机操作