【食药用真菌】第4章-食用菌的菌种制作与保藏.pptVIP

第4章 食用菌的菌种制作与保藏 孢子分离图 * * 概念： 菌种(spawn)是指在适宜基质上生长良好并以充分蔓延，可以作为食用菌生产的种源菌丝体。 一、菌种类型和生产流程 菌种类型： 按培养基的形态分：（1）固体菌种 （2）液体菌种 按菌种的来源、繁殖代数分： 母种（一级种）、原种（二级种）、栽培种（三级种） 1. 母种 母种系指由孢子、子实体组织、菇（耳）木或基质菌丝分离纯化，并在试管培养基上繁殖的菌丝体、芽孢及其培养基质。母种经出菇试验后可用于生产称为一级种。 2. 原种 原种系指由母种扩大移植于固体或液体培养基上繁殖的菌丝体。亦称二级种。 3. 栽培种 栽培种系指由原种扩大移植于固体或液体培养基上繁殖的菌丝体。亦称三级种。通常以菌种瓶或菌种袋为容器。 菌种生产流程 菌种分离（孢子、子实体、菇木等） 培养基制备→高压灭菌→接种→母种→出菇试验→一级种 培养基制备→高压灭菌→ 接种 （常压灭菌）原种（二级种） 培养基制备→高压灭菌→ 接种 （常压灭菌） 栽培种（三级种） 大规模生产或工厂化生产 一）孢子分离法 1）种菇的选择标准：菌株性状优良、发育健壮、无病虫害、熟度适当。 2）种菇的表面消毒：草菇、蘑菇可用0.1%升汞溶液浸泡2-min进行表面消毒，香菇、平菇用75%酒精进行表面消毒。 二、菌种分离方法 （1）多孢分离法 整菇播种法（孢子收集器） 钩悬法 贴附法 褶上抹取孢子法 孢子印分离法　　　　　　　　 空中孢子捕捉法 3）方法: 孢子→PDA （2）单孢分离法 二）组织分离法 子实体分离：选择优秀的子实体→75%酒精表面消毒→掰开菇体→菌柄和菌盖处切取组织→接入斜面。 菌核分离法：同子实体分离。菌核有猪苓、茯苓、雷丸等。 连续稀释法 3. 菌索分离法：蜜环菌菌索→75%酒精表面消毒→去掉黑色外皮层（菌鞘）→切下白色菌髓→接入斜面。 三）基内菌丝分离法 菇木（耳木）分离法：选择菇木→清洗表面→锯下一段→干燥→中间挖取一小块（无菌操作） →接入斜面（见图）。 代料基质分离法：同菇木分离。 二）组织分离法（续） 菇木、耳木分离法 四）土中菌丝分离法 采集菇体下与菇根相连的菌丝束→无菌水冲洗干净→无菌纱布吸干→切下菌丝束→ 接入斜面（培养基含有抗生素）→出菇鉴定。 本方法适用于野外分离野生菇类。 宏观检查：用肉眼或放大镜检查菌丝体的颜色、粗细、生长速度和致密度，有无爬壁现象、菌丝老化是否分泌色素、菌丝在试管斜面上是否能形成原基。 微观检查：利用显微镜对菌丝形态特征进行观察，如菌丝粗细是否均匀、有无锁壮联合、菌丝的分支情况。 四、菌种的检验