[工作范文]第六章第三节其他致病菌的检验3.pptVIP

三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 2、 样品的处理: 以无菌操作采取样品25ml(g)置于灭菌均质器中,加入225ml的EB和LB增菌液,充分搅拌均匀.如不能及时检验,可保存在4℃冰箱中. 3 、 增菌培养 EB增菌液放入(30+-1)℃温箱中培养48h-72d.LB1增菌液放入(30+-1)℃温箱中培养24h,取出0.1ml加入10ml的LB2增菌液中2次增菌. 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 4、分离培养 将EB增菌液和LB2增菌液分别画线接种于MMA选择性培养基琼脂平板上,置(30+-1)℃培养48h小时,挑选可疑菌落,用白炽灯45度角斜光照射平板,该菌的菌落为灰蓝或兰色小圆形菌落. 选择MMA平板上5个以上的可疑菌落接种三糖铁琼脂和SIM动力培养基,培养于(25+-1) ℃,观察是否有动力,且伞状或月牙状生长.一般观察,阳性者作下一步实验. 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 三糖铁（TSI）琼脂试验 SIM动力试验 接种三糖铁琼脂，35℃培养5天。 斜面和底层产酸，不产生硫化氢者为可疑菌落（发酵葡萄糖和蔗糖） 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 5 、纯培养 将上述有动力、伞状，并在三糖铁琼脂培养基上层下层产酸而不产硫化氢的可疑菌落接种于胰酪胨大豆琼脂培养基（YSA-YE）上，做纯培养，供做证实试验鉴定用． 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 6、染色镜检：从YSA-YE平板上挑 取可疑纯培养物做革兰氏染色并做湿 片查．该菌为阳性无芽孢杆菌；用生 理盐水制成菌悬液，在油镜或相差显 微镜下观察，该菌出现轻微旋转或翻 滚样运动． 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 革兰氏染色阳性 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 6、生化试验：将上述可疑菌落做进一步的生化试验，该菌的生化特征及种间区别如下： +为阳性；-为阴性；√为有反应 ＋ ＋ － √ ＋ ＋ ＋ － ＋ － 墨氏 ＋ ＋ － － ＋ ＋ ＋ － － － 格氏 ＋ ＋ ＋ － － ＋ ＋ － － ＋ 西尔斯 ＋ ＋ ＋ √ － ＋ ＋ － － － 威尔斯 ＋ ＋ － √ － ＋ ＋ － － － 英诺克 ＋ ＋ ＋ － － ＋ ＋ － － ＋ 绵羊 ＋ ＋ － ＋ － ＋ ＋ － － ＋ 单增 H2O2酶试验 七叶苷 木糖 鼠李糖 甘露醇 V-P试验 MR试验 尿素酶 硝酸盐还原 溶血反应 项目 菌种 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 6、生化试验 溶血试验：7%羊血琼脂平板，划分小格，刺种菌落。 做阳性对照和阴性对照（英诺克李斯特氏菌）。 35℃培养24-48小时，于明亮处观察。 单核细胞增生李斯特氏菌在 刺种点产生窄小的透明β 溶血环。 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 * * 第六章 食品中病原菌的检验  第五节 其他致病菌的检验 单核细胞增生李斯特氏菌及其检验 主要内容： 一、生物学特性 二、流行病学 三、检验 四、控制 李斯特氏菌属 李斯特氏菌属包括七个种： 单核细胞增生李斯特氏菌 、绵羊李斯特氏菌 、英诺克李斯特氏菌 、威尔斯李斯特氏菌 、西尔李斯特氏菌 、格氏李斯特氏菌 、默氏李斯特氏菌。 其中单核细胞增生李斯特氏菌对人类致病性强，绵羊李斯特氏菌对人类也有一定的致病性，其余李斯特氏菌无致病性。 单核细胞增生李斯特氏菌 单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。 它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表现为败血症、 脑膜炎和单核细胞增多。 它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，在食品卫生微生物检验中，必须加以重视。 全身传染 毒血症：病原菌在入侵的局部生长繁殖，细菌不侵入血流，只是其产生的毒素侵入血流引起全身性状．白喉、破伤风 菌血症：病原菌入侵机体后进入血流，但不在血流中繁殖，如伤寒、流行性脑脊髓膜炎的早期有菌血症期. 脓毒血症:病原性球菌引起的败血症.由于病原菌随血流播散,在全身多种组织或脏器(肝肺肾皮下等)引起多发性化脓病灶.如金黄葡萄球菌导致的脓毒血症. 败血症:见前 一、生物学特性 1、形态与染色 革兰氏阳性短杆菌，大小为0.4~0.5×0.5~2μm，在有些培养基中稍弯，多数菌体一端较大，似棒状，细胞常呈V字形排列，在较老的或生长不良的培养物中，可能形成丝状。 20-25℃以4根周生鞭毛运动，在37℃只有较少的鞭毛或1根鞭毛； 无芽孢。在血清葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖荚膜。 一、生物学特性 2、培养特性 该菌营养要求