中学联盟江苏省赣榆县海头高级中学人教版选修一生物课件：专题2 微生物的培养与应用(共64张PPT).ppt

灼烧 灭菌法 酒精灯火焰灼烧 干热 灭菌法 干热灭菌箱160～170 ℃加热1～2 h 高压蒸 汽灭菌法　　 高压蒸汽灭菌锅 100 kPa、121 ℃维持15～30 min 微生物接种工具如接种环、接种针或其他金属用具等，接种过程中试管口或锥形瓶口等 玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品 培养基及多种器材、物品 （5）常用的灭菌方法 （1）灼烧灭菌： （2）干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 （3）高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min。 灭菌方法与用具： 适用于接种环（针）或其他金属用具。 适用于耐高温，但需保持干燥的玻璃器皿（吸管、培养皿）、金属制品等。 适用于耐高温，但无需保持干燥的物品（如培养基等）。 消毒与灭菌的原理： 消毒与灭菌的最大区别：芽孢与孢子是否成活 相同 都是利用物理或化学方法使微生物的核酸和蛋白质变性来抑制微生物生命活动或杀死微生物 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 思考与讨论 二、实验操作：（以进行大肠杆菌的纯化为例） （一）制备牛肉膏蛋白胨培养基: Ⅰ、配方：P17 （1）计算： （2）称量： （3）溶化: （4）调pH：调至pH7．0－7.2（课本内容无此步骤） （5）灭菌： （6）倒平板：　 Ⅱ.操作步骤: P16-17 倒平板技术： 微生物的实验室培养. Ⅲ.注意事项 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温 度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 思考与讨论 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培 养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可避免培养 基表面的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落 入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 准备好了吗？ 第3课时 课题1 微生物的实验室培养(2) （二）纯化大肠杆菌: (1)接种方法：平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种、穿刺接种等。 1、微生物的接种技术: 最常用的接种方法：平板划线法、稀释涂布平板法 (2)核心： 防止杂菌污染，保证微生物的纯度 ①概念：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面. （3）平板划线法: 在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体——菌落. ?平板划线的操作方法： 连续划线法 交叉划线法 2.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个细菌繁殖形成的菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 思考与讨论 1.为什么平板划线时不能划破培养基？ 一是划破会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 3.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 避免接种环温度太高，杀死菌种。 4.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 （4）稀释涂布平板法: ?概念: 课本P19 ?稀释涂布平板法的操作方法 系列稀释操作： 涂布