电子显微镜的原理和医学用途.ppt

电子显微镜的类型 透射电镜 扫描电镜 超高压电镜 电子探针 分析电镜 其他类型电镜 透射电镜 （TRANSMISSION ELECTRON MICROSCOPE） 以电子束为照明源，电子束穿透样品，在穿过样品时电子束被标上了样品的信息，经多级放大后在荧光屏上成像的大型仪器。产生的图像是平面的. 它要求样品极薄，因此样品必须制备成50—70nm的超薄切片 扫描电镜（SCANNING ELECTRON MICROSCOPE） 是观察物体表面立体微细形貌的电子显微镜。是利用电子束照射物体表面时，能引起二次电子的发射，而二次电子的发射量与样品的表面形貌有关。当照射的电子束在样品表面移动时，二次电子的量将随之表面形状不断变化，通过对信息的收集，就可以得到反映样品表面特征的扫描图像。扫描电镜能观察样品表面凸凹不平的结构,得到立体的.富有真实感的图像。 二次电子：指被入射电子轰击出来的核外电子。由于原子核和外层价电子间的结合能很小，当原子的核外电子从入射电子获得了大于相应的结合能的能量后，可脱离原子成为自由电子。如果这种散射过程发生在比较接近样品表层处，那些能量大于材料逸出功的自由电子可从样品表面逸出，变成真空中的自由电子，即二次电子。二次电子来自表面5-10nm的区域。它对试样表面状态非常敏感，能有效地显示试样表面的微观形貌。 超高压电镜（HIGH-VOLTAGE ELECTRON MICROSCOPE） 普通常用的透射电镜的加速电压一般为40-200KV。而超高压电镜的加速电压可以达到500-3000KV，电子束的穿透能力很强，可以观察较厚的切片。 电子探针：电子束照射被检测的样品的表面用X 射线能谱仪或波谱仪，测量电子与样品相互作用所产生的特征X 射线的波长与强度， 从而对微小区域所含元素进行定性或定量分析，并可以用二次电子或背散射电子等进行形貌观察。 分析电镜：通常说的分析电镜是指以透射电镜为基础，加上扫描、X射线能谱、电子能量损失谱（成分分析用）等附属装置后的电镜。可以在观察样本形貌的同时了解微小区域内所含元素的种类及其含量，在细胞超微结构水平上对其内部的化学元素成分进行定位、定性、定量分析。 其他类型电镜 高分辨率扫描透射电镜 低压电镜 扫描隧道显微镜 原子力显微镜 电子显微镜在医学中的应用 诊断电镜学 肿瘤诊断 病毒诊断 肾活检 心肌活检 肝活检 肌肉活检 遗传性疾病 基础医学研究 超微结构学 超微病理学 电镜细胞化学 免疫电镜 定性定量研究 交叉学科（医工结合）研究 纳米医药新技术 复习题 ?1、电镜的常见类型和主要特点？ 2、何谓分辨率？放大倍数、空放大、有效放大？ 3、阿贝公式？ 4、什么是像差、球差、像散、色差？ 5、什么是反差、电子染色？ 医学电镜和超微病理 刘秀芳 xfliu1981@126.com参考书籍 武忠弼主编。超微病理诊断学。上海科学技术出版社，2003。 史景泉，陈意生，卞修武主编。超微病理学。化学工业出版社，2005。 杭振镛，蔡文琴主编。电子显微镜术在临床医学中的应用，1990。 钟慈声主编。细胞和组织的超微结构。人民卫生出版社，1984。 凌冶萍，俞彰主编。细胞超微结构与电镜技术——分子细胞生物学基础。复旦大学出版社，2004. 电镜的基本原理 电镜的结构和使用 （实验） 透射电镜制样技术 扫描电镜制样技术 电镜酶细胞化学及免疫电镜技术 透射电镜制样（实验） 超微结构和病理 激光共聚焦显微镜原理 激光共聚焦显微镜观察（实验） 电镜观察（实验） 课程内容 病理学（PATHOLOGY）是用自然科学的方法，研究疾病的病因、发病机制、形态结构、功能和代谢等方面的改变，揭示疾病的发生发展规律，从而阐明疾病本质的医学科学。 超微病理学（ULTRASTRUCTURAL PATHOLOGY)从组织细胞的超微结构水平来观察和分析研究疾病的发生发展规律。 显微镜的发展历史 球形透明物体观察微小物体，可使其放大 1590年，荷兰詹森父子，第一台显微镜 人类对微观世界不断探索 1610年，意大利伽利略制成望远镜 1665年，荷兰，列文虎克，红血球，及雨滴中的微生物。 1665年，英国，罗伯特胡克，软木塞切片，发现小室，称为“cell”。 1872年，阿贝，油镜。 20世纪初至中期，相差显微镜、偏光显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜、紫外光显微镜。 1924，1926年，发现高速运动的电子流具有波动性和可折射性。 1932年，德国，knoll和Ruska，第一台透射电子显微镜。 1942年，剑桥大学，马伦，第一台扫描电子显微镜。 1982年，德国，宾尼格；瑞士，罗雷尔，扫描隧道显微镜。1986同Ruska分享了诺贝尔物理学奖。 电子显微镜的原理、构造和医学用