中国药典2010年版－－薄层色谱讲义.pptVIP

第一节　概　述 第二节　薄层色谱的基本技术 第三节 影响薄层色谱分析的主要因素 操作方法 薄层色谱就是将吸附剂均匀地铺在玻璃板上，把欲分析的样品加到薄层上，然后用合适的溶剂展开而达到分离、鉴别和定量的目的，因为层析是在薄层上进行，所以称它为薄层色谱法 前 景 近年来，由于薄层扫描仪的出现以及高质量的预制板、高效薄层板的应用以及上样技术的改进。目前，薄层色谱已经进入仪器化、高效化、定量化及数据处理自动化阶段，即向仪器化薄层色谱发展。 薄层色谱法作为一种敞开系统的色谱技术对分析工作者仍具有吸引力。尤其是对成分复杂的中药有着重要的意义。中国药典2005年版共收载了784个中药品种，其中就有1523项用于薄层鉴别项目，含量测定45项，从而说明了薄层色谱技术在中药鉴别方面的重要性 不足之处 薄层色谱法在仪器自动化程度、分辨率及重现性等方面不如后来发展起来的气相色谱法和高效液相色谱法。 原 理 薄层色谱法是色谱法中应用最普遍的方法之一，薄层色谱法按分离机制可分为吸附、分配、离子交换等方法。其中吸附色谱是最常用的层析方法，吸附色谱的原理是利用吸附剂对不同物质的吸附力大小，从而达到分离的目的。 【实验装置】 采用卡玛Nanomat?4手动点样仪，它操作简便，点样位置准确，不损伤薄层，结果优于传统手工点样。 半自动点样仪 全自动点样仪 操作程序： 一、 制 板 二、 点 样 三、 展 开 四、 显 色 薄层色谱法的操作及应用 第三节 影响薄层色谱分析的 主要因素 一、样品的预处理 一般地将被检样品用合适的溶剂（常用甲醇、乙醇）提取，直接上样，即可达到分离，但未经处理的甲醇或乙醇提取液却经常由于杂志太多无法得到高质量的薄层色谱，尤其是复方中药制剂，样品的预处理是一个值得注意的步骤。 例如：参苓白术散中的人参和甘草的薄层鉴别，用甲醇直接提取有两个扩斑点（黑红色）掩盖了人参很多斑点。甲醇提取液用正丁醇处理后，糖点去除后，图谱好多了。再经上注后，则斑点分离更清晰了，可得到质量高的薄层色谱。 样品供试液净化的方法通常有： 1)单一溶剂萃取法：如浙贝母、平贝母、洋金花等均利用在碱性介质下用氯仿或苯将其所含的生物碱有选择地萃取出来，而舍弃其他成分，使供试液得以净化. 2)分段萃取法：如龙胆泻肝丸先用正己烷萃取，供当归鉴别用；经用丙酮萃取，供用以鉴别马兜铃酸；最后用甲醇萃取再经氧化铝小柱用甲醇洗脱，以鉴别龙胆苦苷，是利用了各自不用的溶解度，用不同极性的溶剂分段萃取，从而达到样品供试液净化的目的 3）液液萃取法：如小儿化毒散中牛黄的鉴别，先用稀碱液将胆酸类成分溶出，用乙酸乙酯洗涤；再在酸性条件下，用醋酸乙酯萃取，以减少其他成分和杂质的干扰。 4）固液萃取：将样品的提取液通过小柱（如：硅藻土柱）萃取，萃取液再经浓缩等处理后作为供试液。用固液萃取或洗脱的方法制备样品，是色谱分析常用的方法，目前用的较多的是AL2O3柱。 谢 谢 ！ 薄层扫描仪 系指用一定波长的光对薄层板上有吸收的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点，进行扫描，将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。 返回 技术参数  　　 1.点样方式：喷雾式点样； 点样平台：最大可放20x20cm薄板；  　　 2.平台驱动：步进马达3200步/转，80步/mm，速度10mm/s；  　　 3.点样带长度：0（点状）-190mm；进样针规格：100ul或500ul；  　　 4.进样针驱动：步进马达1600步/转；（接下）  　　 5.100nL/120步，100ul进样针；100nL/24步，500ul进样针；  　　主要特点  　　1.点样准确度：优于0.5%；点样重现性：优于1.0%；  　　2.记忆：可储存10个方法，断点可保存至少十年；  　　3.显示：LCD，2行16位；  　　4.气体压力：4-6bar；气体消耗：1.0L/min；  5.电源：85-250V/47-63Hz/20VA 　　 　　仪器介绍 ： 　　 1.把样品以条带状喷射在TLC/HPTLC薄层板上 　　 2.喷雾点样技术相比,接触式点样可将更多样品点在薄层板上 　 3.在点样过程中样品被浓缩到所选取长度的狭窄条带中条带状点样可得到最高的分辨率，对所有薄层色谱工作都有益 4.CAMAG半自动点样仪5