目的基因的克隆与基因文库的构建精美生物医学.ppt

基因文库 请你找找看…… 什么是基因文库，由哪两部分组成呢？ 构建基因文库由什么用呢？ 构建一个基因文库都有哪些基本步骤，请概括！ 一．基因文库概述 1、概念 基因文库 (library)：一套包含某生物体 所有基因的DNA序列。 这些序列分别与适当的载体结合在一起。 2、基本组成 包括：基因组文库、cDNA文库 cDNA：由mRNA逆转录的DNA，因此不 含非转录的基因组序列。 单链cDNA可由DNA聚合酶转变成双链，应用于基因工程。 基因组文库 Genomic DNA library 使用与切割载体相同的限制酶，将供体生物的基因组DNA切割成许多片段 将所有片段连接到载体上，构成一个重组DNA群体 这个群体包含全基因组的遗传信息 cDNA文库（ cDNA library ） 以mRNA为模板，经反转录酶合成互补 DNA(complementary DNA，cDNA) 将双链cDNA与适当载体连接 转化到宿主细胞内进行扩增，建成cDNA文库 基因组文库与 cDNA文库的比较： 基因组文库包含基因组的所有基因 cDNA文库只包括某一特定细胞类型、某一组织、或某一发育时期的表达序列 分离特定基因，cDNA库比较方便 研究调控序列，必须用到基因组文库 3、构建目的 创