微生物共性与纯培养培训讲解.pptVIP

微生物的共性与纯培养 第一章 本章重点 了解微生物的共同特性 掌握无菌技术和纯培养概念 掌握微生物的保藏技术 微生物的共性 第一节 1、体积小，面积大 2、吸收多，转化快 3、生长快、繁殖旺 4、适应快、易变异 5、分布广、种类多 一、体积小、面积大 计量单位： 细胞以um计，亚细胞以nm计； 比表面积： 面积/体积 人比表面积＝1 大肠杆菌比表面积为人的30万倍 举 例： 杆菌平均长2um,宽0.5um， 3000个头尾相接与1颗米粒长度相等， 60-80个肩并肩的长度与1根头发丝等， 10-100亿个重1mg。 实际应用 高效益，周期短，用于发酵工业 有益的 500kg牛，蛋白质0.5kg/昼夜 500kg酵母，5×104kg/24h优质蛋白 有害的 病原微生物带来极大危害 四、适应快、易变异 温度：最高250～300℃，最低0℃、－196℃、－253℃ 盐度：32％饱和盐水 干燥：产芽孢菌干燥保存几十、几百或上千年 耐酸菌：pH0.5，硫酸环境 耐碱菌： pH10.7，9 ～11 抗辐射：大肠杆菌104、耐辐射微球菌7.5x105 抗静水压：酵母500、霉菌3000、植物病毒5000 适应性表现 易变异表现 变异频率：10-5~10－10 变异常见形式：基因突变 举例： 青霉素产量 20单位/ml－5万单位/ml－10万单位/ml 青霉素治菌浓度 40年代 10万单位/d 现在 新生儿 40万/d 成人 80万/d 五、分布广、种类多 分布广 人体肠道 万米海沟 万米高空 种类多 代谢类型多 代谢产物多 微生物种类多 第二节 微生物的分离和纯培养 无菌技术 固体培养基分离微生物 液体培养基分离微生物 单细胞培养 二元培养物 微生物的保藏技术 主要了解 一、无菌技术 巴斯德的曲颈瓶实验 几个概念 无菌技术处理后达无菌程度 灭菌消毒防腐化疗 根据对微生物的作用原理 抑菌杀菌溶菌 (一)无菌技术 1、概念：在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术被称为无菌技术。 2、常用器具与灭菌：试管、烧瓶、平皿等。 3、接种操作：接种针与接种环。 (二)纯种分离技术 常用：琼脂平板培养技术 优点：简便有效的微生物常规技术。 应用：微生物菌种的筛选、鉴定、育种和计数等各种微生物的测定 (三)纯种培养技术 可获得纯种微生物进行大规模工业化生产，以生产或积累代谢产物，使人们得到自己需要的产品 发展趋势 从利用自然菌种培养到利用变异菌株至“基因工程菌”培养 从利用分散的微生物细胞培养发展到固定化细胞培养； 从以固体培养发展到以深层发酵法； 从静止培养法发展到通气搅拌培养法； 从以单罐培养法发展到连续培养以及多级连续培养； 从以浅层培养为主发展到以液体培养为主； 二、分离方法 (一)菌落与菌苔 1、菌落：单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、 繁殖到一定程度可形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落。 2、菌苔：当固体培养基表面众多的菌落连成一片时，称为菌苔。 菌落与菌苔 变形杆菌 枯草杆菌 产气杆菌 (二) 用固体培养基分离培养 1、稀释倒平板法：菌落在培养基表面与内部生长 2、涂布平板法：菌落在培养基表面生长 3、平板划线法：用接种环划平行、扇形或其他形式的连续划线，微生物随划线次数增加而减少 4、稀释摇管法：用于分离严格厌氧菌的方法，与稀释倒平板法的区别是在试管培养基上面加一层无菌的液体石蜡与固体石蜡的混和物 稀释倒平板法与涂布平板法 稀释倒平板法 涂布平板法 平板划线法 稀释摇管法