辐射诱发的染色体畸变技术 培训.pptVIP

* * 辐射诱发的染色体畸变 目的 掌握辐射对染色体损伤的原理 掌握染色体样品的制作程序 熟悉染色体样品的分析 染色体是DNA和蛋白质的复合体,对电离辐射十分敏感; 基因组DNA是辐射作用最基本的靶分子; 染色体畸变是反应辐射损伤的良好指标,它既能察觉辐射损伤和评价损伤程度,又能估算受照剂量。 Chromosome 原 理 人类染色体: 染色体(chromosome):有丝分裂中期核内易被碱性染料着色的丝状或棒状小体; 染色体功能:因为有能自我复制的基因,因而有存储、传递遗传信息,调控细胞分化、发育的功能。 染色体是DNA和蛋白质的复合体,对电离辐射十分敏感; 辐射诱导的染色体畸变 电离辐射(X、r、中子) 细胞内产生次级电离离子 能量沉积 细胞原子非特异性电离 自由基或间接引起继发反应 分子改变 靶细胞DNA损伤 修复/未修复、误修复 点突变(point mutation) CA 步骤 1 ．用经肝素湿润的 2 毫升注射器,自静脉或耳垂、手指取血 0.5-1.0 毫升。 2 ．每 5 毫升培养基中加全血 0.3-0.4 毫升,塞紧瓶塞后置 37 ℃ 箱中培养 72 小时。 3 ．秋水仙素处理:培养至 68 小时左右,在火焰