实验动物的繁殖和保种方法技巧.pptVIP

* * 实验动物的繁殖和保种 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 任务三 实验动物遗传质量控制 工作步骤： 免疫学方法进行遗传监控 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 项目对应的工作岗位群： 实验动物饲育员 实验动物遗传质量检测工作人员 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 步骤一  免疫学方法进行遗传监控 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 三. 工作方法（1）： A．背部皮肤移植 1 抽取动物，详细记录其编号，品系名称，性别、出生日期、体重及特征等，用无菌生理盐水配制0.7%戍巴比妥钠溶液0.1ml。每20克体重大鼠或每10克体重小鼠腹腔内注射0.7%戍巴比妥钠溶液0.1ml。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 2 根据不同品系动物对麻醉剂的不同敏感性，适当增减注射量。将麻醉后的动物固定在蜡盘或木板上，剪去被毛，以3％碘酒和75%精棉球消毒。从鼠背左右两侧各剪下直径5－10mm的皮肤各一块（一块用于自体移植，另一块用于异体移植）。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 3 将剪下的皮片（皮下组织向上）放在载玻片上，轻轻去掉皮下组织至真皮，并用无菌生理盐水?冲洗。两只动物的皮片，左片用于自体移植，右片以逆毛方向互相交换移植并使之吻合 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 4 覆盖涂有凡士林和青霉素G的纱布块，并用纱布包札3－4圈，松紧适度。用毛笔沾上石膏糊（以40℃热水调成糊状）封闭，挂上标记卡片。一周后拆除石膏包札。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 (1) 拆除包札后，如皮片干瘪，脱落应视为移植技术失败。对照自体移植失败率不得大于10％。?皮片在移植后2－3周内被排斥，应视为急性排斥。其表现为皮炎、水肿、坏死、结痂直至脱落。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 5 结果观察 (2) 异己遗传污染通常引起急性排斥。皮片在三周后被排斥，视为慢性排斥。其表现为逆毛脱落至无毛或留下凹掐疤痕。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 (3)移植物是否慢性排斥至少观察100天,遗传突变通常引起慢性排斥。 (4)皮片在100天的观察期内，其逆毛始终生长者，则为永久接受的标志。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 三 工作方法 （2） 尾部皮肤移植 1 动物的选取，编号、麻醉等。待动物麻醉后，以5只为组按顺序取仰卧或放在一块滤纸上，用3％碘酒棉球和75％酒精棉球消毒鼠尾。 2 用左手食指按住动物尾根，左手拇指按住尾尖，固定鼠尾并使其微微伸展，然后右手持解剖刀，?刃面朝前，避开尾静脉，与尾部皮肤成20－30夹角，在离尾根部5mm处削下一片宽约2－3mm，长约7－8?mm的皮肤，其厚度以创面有点状渗血为宜，或以能暴露出白色的肌键但又不割伤血管为宜。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 右手将刀片逆时针方向转交左手，附着在刀片上的皮片相应转了180。用镊子取下皮片贴在原创面上，尽量使其吻合，在皮片上覆盖一片滤纸，轻轻按压后取掉滤纸片。该移植物作为自体移植对照。 项目三任务三实验动物遗传质量控制 免疫学方法进行遗传监控 *