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显微镜下细胞消化前后示意图 * 实验室要求 点名签到 穿白大衣 损坏公物要赔偿 保持实验室整洁干净、每次实验毕安排值日生 细胞与遗传实验课程要求 每班根据实验需要分组,以组的形式完成细胞与遗传系统性实验 每次实验后,每人写实验报告1份(提交) 系统性实验结束后,每人写实验小结─细胞、遗传各1份(提交) 当逢课外加时,望能安排时间并请谅解 认真参与实验(思考、总结、提问和建议) 实验(一)细胞损伤与保护1 活细胞观察 细胞传代培养 细胞计数 实验室基本条件 无菌环境 仪器设备 普通器材 一般试剂 无菌环境 无菌室 无菌操作 无 菌 室 结 构 图 back 无菌操作 洗手 着装 近火焰操作 试剂瓶等斜放 back 超 静 工 作 台 二 氧 化 碳 培 养 箱 液 氮 罐 back 器 材 back 试 剂 back 活细胞观察 体外培养的、生长中的细胞,借助显微镜来进行察看、比较、判断,以求对细胞做出进一步处理。 器材 倒置显微镜 培养细胞株 方 法 肉眼观察 显微镜下观察 肉眼观察 培养液清浊度 培养液颜色 显微镜下观察 细胞的密度 细胞的透明度 细胞的形状 光学显微镜(10倍)下活细胞形态 光学显微镜(10倍)下活细胞形态 光学显微镜(40倍)下活细胞形态 光学显微镜(10倍)下活细胞形态 back 细胞传代培养 细胞在支持物表面长满后,进行重新分配,再培养的过程。 器材与试剂: 超净工作台 二氧化碳培养箱 倒置显微镜 细胞株(CHL) 滴管、培养瓶、瓶塞等 培养液:DMEM ( 含10﹪小牛血清) 消化液:0.25﹪胰蛋白酶液 操 作(无菌) 细胞株──弃原培养液──加 胰旦白酶液(消化细胞)──弃胰旦白酶液 ──定量加入培养液1ml,冲打细胞成悬液──取1滴细胞悬液细胞计数──按需接种至新培养瓶(皿) ──补足新鲜培养液──37℃培养 1-2min 细胞传代消化法示意图
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