在基因水平诊断疾病方案介绍.pptVIP

在基因水平诊断疾病Gene Diagnosis;第一节 基因诊断的概念及常用技术;第一节 基因诊断的概念及常用技术; ;Hybridization and PCR are basic techniques used in gene diagnosis; 核酸变性和复性理论：（1）双链DNA分子在某些理化因素作用下解旋，条件恢复后又可恢复其双螺旋结构；（2）具有互补碱基序列的异源核酸单链之间同样可按碱基互补配对原则通过氢键结合为双链。 ;核酸分子杂交和PCR扩增 是基因诊断的基本技术;核酸分子杂交和PCR扩增 是基因诊断的基本技术; 针对具体情况选择合适的探针序列是基因诊断准确、特异、简便、可靠的基础。;2.不同形式的核酸分子杂交 可用于不同的诊断目的;2.不同形式的核酸分子杂交 可用于不同的诊断目的;Hybridization and PCR are basic techniques used in gene diagnosis;PCR原理示意图;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;3.病毒性肺炎 如冠状病毒、腺病毒、流感病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等。 　　4.真菌性肺炎 如白念珠菌、曲霉、放射菌等。 　　5.其它病原体所致的肺炎 如立克次体、弓形虫、原虫、寄生虫如肺包虫、肺吸虫、肺血吸虫）等。机体免疫力低下者（如艾滋病患者）容易伴发肺部卡氏肺包子虫、军团菌、鸟形分支杆菌、结核菌、弓形体等感染。 　　6.理化因素所致的肺炎 如放射性肺炎、胃酸吸入、药物等引起的化学性肺炎等。 　　7.支原体肺炎 由肺炎支气体引起。 编辑本段发病原因 ?? 肺炎 　　患肺炎的原因可能是：接触到一些厉害的病菌或病毒身体抵抗力弱， 如长期吸烟。上呼吸道感染时，没有正确处理。例如是没有正确地看医生、没有正确地看服药，又或者是滥用止咳药止咳以至痰和菌愈积愈多（Sputum retention)。 　　如果一年内有多过一次真正的肺炎 （一些医生误看X光片或滥用了肺炎的诊断)，原因可能是：身体抵抗力弱 （先天性或后天性) 气管有异物。尤其是幼童。 心肺有其它病变：如癌病、气管扩张、肺尘埃沉着病、没有正确地看医生、没有正确地看服药，又或者是滥用止咳药止咳以至痰和菌愈积愈多（Sputum retention) 工作环境有问题。注意改善空气流通、冷气系统。 ;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;PCR-SSCP分析原理示意;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术; 3’ GGACGTAGA5’ 非甲基化引物 5’---CCTGCATCT------- GCGCTAGGC----3’ 3’---GGACGTAGA-------CGCGATCCG---5’ 5’GCGCATGGC 3’; 3’ GGACGTAGA5’ 5’---CCTGCmATCT------- GCGCTAGGC----3’ 3’---GGACGTAGA ------- CGCGATCmCmG---5’ 5’GCGCATGGC 3’;（二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术;PCR扩增有限性-平台期及平台 效应（plateau effect） ; PCR及其衍生技术 8. 靶核酸的定量分析 （1）测定PCR产物量： 梯度（系列）稀释法：先对已知量的靶 DNA进行梯度稀释（类似于比色） 灰度扫描法 ;例：PCR产物定量; PCR及其衍生技术 8. 靶核酸的定量分析 （2）极限稀释法 基本依据：PCR扩增的有效起始模板分子数 为104～106个 ; PCR及其衍生技术 8. 靶核酸的