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法医牙齿DNA鉴定之研究摘要

法醫牙齒DNA 鑑定之研究 黃純英*、鍾芳君、黃嘉宏、陳亮如、張翊庭、林俊彥 法務部法醫研究所血清證物組 E-mail: tyhuang@.tw;Tel: 02分機602 摘要 牙齒牙冠由琺瑯質(enamel)包覆,可以抵禦外在惡劣環境,尤其遇到嚴重裂解檢體時, 以牙齒進行DNA 鑑定,被認為是較佳選擇。本研究以無名屍各類牙齒為研究對象,比較各 類牙齒各項DNA 型別檢出率,以瞭解何種牙齒適用於DNA 人別鑑定,及戴牙套牙齒與齲齒 ® 對於法醫DNA 鑑定之影響。以人類DNA 定量試劑Quantifiler Human DNA Quantification Kit ® 及新一代定量試劑Quantifiler Trio DNA Quantification Kit,分析牙齒DNA 量及DNA 裂解指 數(degradation index,DI)。分析各類牙齒STR DNA 15 型及Y-STR DNA 17 型,另分析齲 齒及戴牙套牙齒粒線體DNA HVI 及HVII 片段。研究發現外觀完整牙齒40 人STR DNA 15 型檢出率達98.8%,顯示牙齒相當適用於法醫刑事鑑識。齲齒 17 人STR DNA 型別檢出率達 96.9%,當已無其他更有利檢體時,其為次要選擇。比較各類牙齒人類DNA 定量結果及DNA 型別檢出率,以臼齒檢出率最佳。比較單顆與多顆牙齒DNA型別檢出率,以3-4 顆牙齒進 行DNA 鑑定檢出率較高,因此,採多顆牙齒進行DNA 鑑定,可獲得較佳鑑定結果。由各類 牙齒DNA 檢出率,推估其DNA 品質,認為齲齒DNA 裂解程度較外觀完整牙齒嚴重,因此, 進一步分析齲齒 13 人粒線體DNA,結果均能成功檢出HVI 及HVII 片段,顯示粒線體DNA 適用於微量證物鑑定。本研究建議以牙齒進行DNA 鑑定時,採集臼齒為佳,勿採集齲齒及 戴牙套牙齒。本研究提供牙齒於DNA 鑑定之採樣條件及適用性,供各界參考引用。 關鍵字:DNA 鑑定、無名屍、根管治療、齲齒、STR NGS 分析粒線體全基因體於法醫鑑識之研究 * 、黃純英、鍾芳君、張翊庭、彭冠澄、林俊彥 黃嘉宏 法務部法醫研究所 *E-mail:70026@.tw;Tel:02ext.614 摘要 目前國內法醫DNA 鑑識領域係以毛細管電泳法進行DNA 分析,該技術雖為主流系統, 但仍有許多問題無法解決,例如粒線體DNA homopolymer 之長度(究竟有多少的C)以及粒線 體異質性的問題等。本研究希望評估新一代NGS 技術之鑑定精準度,進而建立NGS 操作標 準,俾利未來應於實務案例上。 本研究為能有效進行NGS 實驗,首先,必須先訂定該技術適當覆蓋率,經評估後發現 以60%的定序覆蓋率仍可得到正確的序列。將60 案法醫檢體經由傳統毛細管電泳定序法及 NGS 定序法定序,實驗結果發現該此二平台均可精確分析HV1 及HV2 序列多樣性,包括 SNP、indels 及heteroplasmy,而NGS 技術對於heteroplasmy 有更精確結果,序列上鹼基變異 情形,均以量化方式表示,並可獲得粒線體全基因體(16569bp)訊息。在靈敏度方面,因傳統 毛細管電泳定序法之PCR 產物片段較NGS 短,所以靈敏度較NGS 技術高,但所得DNA 序 列資訊遠少於NGS 技術;在所需時間方面,因檢體前處理所需之時間相似,但NGS 技術可 同時進行多個檢體定序,因此平均案件所需時間較短。對於同母系血緣關係比較,本研究分 析4 對具有母子關係檢體,發現傳統毛細管電泳法與NGS 定序法,於HV1 及HV2 區皆可獲 得一致結果,但其中有 1 對(2 個檢體)於非HV1 及HV2 區,卻有2 個鹼基變異點。此外,

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