兔血细胞计数.PPT

实验六、兔血细胞的计数及鸭血细胞大小的测量 一.实验原理 利用显微镜并借助血细胞计数板，计算单位体积的液体中所含细胞或微小生物的数量。 二.试剂与器械 光学显微镜、血细胞计数板、兔血。 兔血细胞计数 血细胞计数板 盖玻片 计数室 2 盖玻片 计数室 三．实验步骤 1.取血细胞计数板，检查计数板是否清洁，如有污垢，应先洗涤干净。然后将计数板放于低倍镜下，熟悉计数室的构造。然后加盖玻片盖住两边的小槽。 2.充液：用小滴管将一小滴稀释200倍的兔血滴在盖玻片边缘的玻片上，使稀释血液借毛细管现象自动渗入计数室中。 2 三．实验步骤 1.取血细胞计数板，检查计数板是否清洁，如有污垢，应先洗涤干净。然后将计数板放于低倍镜下，熟悉计数室的构造。然后加盖玻片盖住两边的小槽。 2.充液：用小滴管将一小滴稀释200倍的兔血滴在盖玻片边缘的玻片上，使稀释血液借毛细管现象自动渗入计数室中。 注意事项: 如滴入过多,溢出并流入两侧槽内,使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果，需用滤纸把多余的溶液吸出，以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少,经多次充液,易产生气泡,应洗净计数室,干燥后重做。 三．实验步骤 3.计数：充液后静止1-2分钟，待红细胞下沉后，方可进行计数。 计数中央大方格内 四角及中央共5个中方格内的80个小方格中所有细胞数。 25X16 计数板 长x宽x高= 1mm x 1mm x 0.1mm = 0.1mm3 = 10-4ml (25x16 = 400小格子) 细胞浓度计算公式： 细胞浓度(细胞个数/ml)=(80小格内细胞个数÷80) ×400×104×稀释倍数 计数时为防止重复和遗漏，应按一定的顺序，先自左向右数到最后一格，下一行格子则自右向左，再下一行又自左向右，即呈S形计数。 细胞计数原则 计数分布在刻线上的红细胞时，依照“计上不计下，计左不计右”的原则，判断标准为是否接触三条边线的中间线。 如发现各中方格的细胞数目相差20个以上，表明血细胞分布不均匀，须重新计数。 细胞计数原则 √ X 计算上侧和左侧 接触到中线的细胞 排除下侧和右侧 接触到中线的细胞 四. 注意事项： 防止液体滴入过多，否则溢出并流入两侧槽内，会使盖玻片浮起，体积改变，会影响计数结果。 2. 先用低倍镜找到血球计数器的计数区，调节光源亮度以及孔径光阑大小得到清晰的图像。 五. 实验结果和作业： 计算出每立方厘米(每毫升)的兔血中所含红细胞的数量。 六. 思考题： 1. 比较鸟类（鸭）与哺乳类动物（兔）血红细胞大小及 形态上的差异。 十字板 分划板 网格板 一、实验目的:利用测微尺测量细胞大小 1. 常用显微镜目镜测微尺种类 鸭血细胞大小的测量 二、实验器材: A mitotic fertilized egg from a sea urchin (海胆) 9.2 Light Microscopy Fluorescence Microscopy Laser-Scanning Confocal Microscopy(激光扫描共聚焦显微镜) For better resolution when imaging thick cells. 镜台测微尺 2. 测微尺的使用操作 1毫米分成100个小格 每一小格长度 = 10微米(10μm) 1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜(Olympus显微镜目镜中已安装了测微尺,不必自己安装)； 2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜台测微尺的刻度； 1 mm 目镜测微尺 0 10 20 30 40 50 3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐，然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数。 目镜测微尺的100格与镜台测微尺的50格重合 在某一物镜倍数下： 目镜测微尺每格的值 = 目镜测微尺的格数 镜台测微尺的格数x10微米 镜台测微尺 目镜测微尺 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 a. 将绿豆大小血滴滴于清洁玻片上。 b. 另取边缘平滑的玻片作为推片：推片一端放在血滴的前方，逐渐后移，接触血滴并使血滴沿推片边缘均匀展开，然后将推片与玻片保持 30 － 45 度角，轻轻用力，均匀而迅速地将推片沿玻片表面向前推至玻片另一端，形成头体尾明显的舌形血膜。立即将玻片摇动，使其快速干燥，忌热力干燥。 三、实验步骤:鸭血细胞的观察与测量 1.制作鸭血涂片：