生物化学技术与试验-川北医学院.DOC

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生物化学技术与试验-川北医学院

生物化学技术与实验 (试用版) 川北医学院生物化学教研室 二00五年八月 内容简介 本教材是在04年简易版《生物化学技术与实验》——附生物化学导读与习题的基础上,除去所附的生物化学导读与习题,增加综合性大实验,自主性小课题实验,全本由⑴生物化学常规技术训练、⑵基本技术实验、⑶综合性实验、⑷自主性课题实验、⑸补充实验和参考资料五个板块所构成。前四大板块印制成书,后一板块公诸于校园网上的精品课程——生物化学课程中。具体内容包括:离心技术训练、比色技术训练、电泳技术训练、离子交换柱层析技术训练;酪蛋白等电点的测定、蛋白质的(分段)盐析与透析、血清总蛋白的比色测定及其计量反应曲线的制作、血清蛋白醋纤膜电泳分离及定量实验、血浆脂蛋白凝胶电泳实验、硫铁磷法测定血浆总胆固醇、邻甲苯胺法测定血糖、血清ALT活性测定、唾液淀粉酶的专一性以及温度等因素对酶活性影响、乳酸脱氢酶的递氢作用、Van Slyke酸碱滴定法测定血浆CO2结合力、EDTA配位滴定法测定血清(浆)钙、氧化还原滴定法测定水果蔬菜中Vtc C含量;血清γ球蛋白的分离纯化、AKP的的分离制备及其动力学(Km值)测定、质粒的分离纯化与鉴定、急性肝损伤动物模型的建立及其检测;维生素C测定方法的筛选与建立、血糖测定方法之探讨、动物血浆清蛋白与球蛋白的分离及其比值测定、__对__样品中维生素C含量影响的动态观察、肝素钠生产的最佳洗脱方式和条件的实验研究;PCR技术训练、动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和测定、细胞增殖与凋亡研究方法(细胞形态学鉴定--吖啶橙荧光染色法,DNA片段鉴定—琼脂糖凝胶电泳法,DNA片段鉴定—原位末端标记分析)、维生素C测定方法参考资料(2,6-二氯酚靛酚法、比色法(2,4-二硝基苯肼法、碘滴定法)、课题实验的申报、课题实验的选题与设计(科学研究方法简介)、课题实验(亦即科研)资料的整理与分析、课题实验报告与科研论文的写作。 目 录 实验须知………………………………………………………(001-006) Ⅰ生物化学常规技术训练……………………………………(007-040) Ⅰ-01 离心技术训练……………………………………………………(007) Ⅰ-02 比色分析技术训练………………………………………………(014) Ⅰ-03 薄膜电泳技术训练………………………………………………(021) Ⅰ-04 离子交换柱层析技术训练报告…………………………………(033) Ⅱ生化基本技术实验与测试…………………………………(041-077) Ⅱ—01 蛋白质的(分段)盐析与透析………………………………(041) Ⅱ—02 血清总蛋白的比色测定及其计量反应曲线制作……………(043) Ⅱ—03 酪蛋白等电点的测定…………………………………………(048) Ⅱ—04 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳定量分析……………………(050) Ⅱ—05 唾液淀粉酶的专一性以及温度等因素对酶活性影响………(054) Ⅱ—06 邻甲苯胺法测定血糖…………………………………………(058) Ⅱ—07 乳酸脱氢酶的递氢作用………………………………………(060) Ⅱ—08 硫铁磷法测定血浆胆固醇总量………………………………(062) Ⅱ—09 血浆脂蛋白凝胶电泳…………………………………………(064) Ⅱ—10 血清ALT活性测定……………………………………………(066) Ⅱ—11 Van Slyke酸碱滴定法测定血浆CO2结合力 ………………(071) Ⅱ—12 EDTA配位滴定法测定血清(浆)钙 …………………………(074) Ⅱ—13 氧化还原滴定法测定水果蔬菜中Vtc C含量………………(076) Ⅲ综合实验…………………………………………………(078-095) Ⅲ—01 血清γ球蛋白的分离纯化……………………………………(078) Ⅲ—02 ALP的的分离制备及其动力学(Km值)测定………………(082) Ⅲ—03 质粒的分离纯化与鉴定………………………………………(090) Ⅲ—04 急性肝损伤动物模型的建立及其检测的实验报告…………(094) Ⅳ课题实验…………………………………………………(096-105) Ⅳ—01 对 样品中维生素C影响作用的动态观察…………(096) Ⅳ—02 血糖测定方法之探讨…………………………………………(099) Ⅳ—03 原料肝素钠生产的最佳洗脱方式和条件的探索……………(101) Ⅳ—04 FDP测定对 患者纤溶亢进的动态观察 ………………(103) Ⅴ补充实验与参考资料(见校园网:精品课程☆生物化学)(106-178) ★补充一 PCR技术训练报告 …………………………

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