儿童感染性疾病流行性病原学研究-南宁妇幼保健院.pptVIP

儿童感染性疾病病原学检查 南宁市妇幼保健院检验科 儿童常见感染病原体类型 一、细菌:肠道;呼吸道;神经系统细菌 二、病毒：肠道;呼吸道;神经系统病毒 三、真菌：肠道;呼吸道;神经系统真菌 四、寄生虫：阿米巴原虫、脑囊虫等 细菌培养标本采集与运送 1、血液及骨髓标本采集、运送及处理 2、体液、分泌物标本采集、运送及处理 3、呼吸道标本采集、运送及处理 标本采集、运送及处理 一、呼吸道分泌物（痰液） 令患者早上起床后用清水濑口，不要刷牙，立即从下部呼吸道咳出第一口痰，吐在无菌塑料痰盒中，及时送检。 （二）、尿液（中段尿） 护理人员协助采取中段尿约3ml入无菌试管中，及时送检。 （三）、粪便：取有粘液、脓血部分的粪便置玻璃大便专用管中，如为稀水便，可直接收集于玻璃管中，及时送检。 标本采集、运送及处理 （四）、眼、耳、鼻、喉拭子：将棉拭子沾取少许无菌生理盐水（如沾取的太多，可在无菌生理盐水瓶壁上挤去多余的水份），然后采取可疑部位的分泌物，倒悬于无菌试管内,及时送检。 （五）、脓液：用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液，要尽量多取一些，然后将棉拭置于无菌试管中，及时送检 标本采集、运送及处理 （六）、血液： 1、凡怀疑菌血症和败血病的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，应在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。当然在病人发热或寒颤时采集也可。 2、成人每次采血5—10ml，小儿采血2—3ml； 3、严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀， 4、从抽血到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固，同时要及时送检。 标本采集、运送及处理 （七）、穿刺液：胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液： 严格无菌抽取后，注入含肝素抗凝的无菌试管中，轻轻颠倒试管10余次，使肝素与穿刺液混匀达到抗凝的目的，或直接无菌注入血培养瓶内及时送检。 （八）、胆汁：由专科医生以无菌方法取引流液10ml注入无菌试管。 （九）、脑脊液：以无菌方法取脑脊液3-5ml，置无菌试管内，常温保存送检，如只做培养可直接无菌注入血培养瓶内，及时送检。 。 标本采集、运送及处理 （十）、生殖器官标本：阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。如疑为淋病奈瑟菌感染，做培养检查时，采集的标本应床旁接种并及时放入孵箱培养。 （十一）、烧伤标本：以无菌棉拭子直接采取多个部位创面的脓汁分泌物放入无菌试管中. （十二）、支原体（解脲、人型）培养+药敏的标本采集 1、支原体对干、热抵抗力差，标本采集后应尽快接种支原体运送培养基送检。 2、男性：用细的无菌棉拭子沾取无菌盐水少许深入尿道口内2.5-3cm。 标本采集、运送及处理 二、标本运送 血液和骨髓标本应于采集后立即或24h内运送至细菌室放入培养箱，如不能立即送检，宜室温保存或置于35～37℃环境中，切勿冷藏而导致苛养菌死亡。 三、注意事项 1．血及骨髓培养宜在使用抗菌药物之前采集标本，并注明标本采集时间，精确到小时。 2．标本采集过程中必须严格无菌操作，以免将污染菌误以为病原菌。 标本采集、运送及处理 3．要保证足够的标本量，以提高血液或骨髓培养的阳性率。 4．根据患者的具体情况，采用不同的培养瓶，危重患者可同时采用多种培养瓶，以免漏检，必要时增加送检次数。 5．培养基宜保证高营养，应注意培养菌的检出。 检验程序及方法 一、血液及骨髓培养标本的细菌学检验程序 二、检验方法 一般血液或骨髓培养推荐同时送检需氧及厌氧血培养，因厌氧菌血液感染约占菌血症病原菌的5％～l5％。 (一)传统手工血培养检验方法 1．培养及转种 将血液或骨髓标本注入培养瓶(培养瓶系实验室自行配制或双相血培养瓶)。置于35℃恒温箱内，每天观察并记录培养瓶的变化，包括肉汤浑浊度、沉淀、菌膜、溶血、色素等，双相培养瓶肉汤如有异常，或琼脂斜面上有菌苔、菌落出现，应及时涂片、革兰染色镜检，并根据涂片的细菌形态与染色性选择相应的分离培养基进行转种。转种培养基分别为血平板、巧克力平板、麦康凯、沙保弱、高渗平板等。通常肉汤培养7d如无菌生长则报告阴性结果。 检验程序及方法 2．如为厌氧培养瓶 则瓶内含85％N2、10％CO2、5％H2，厌氧瓶为密闭型，需逐日观察瓶内肉汤的变化，若需氧瓶无变化，厌氧瓶肉汤有变化，即可考虑有厌氧菌生长，应涂片及转种厌氧血平板后置厌氧环境进行分离培养，应注意避免氧气进入培养瓶。 3．适当运用盲转法可提高阳性率 血培养l2h后如无明显变化，可盲转一次，同时涂片革兰染色镜检，可提