不同後熟特性之番石榴果实ACC合※穧之选殖与分析.PDFVIP

行 不  精 類 行 年年 行 立 參 理 年 行政院國家科學委員會補助專題研究計畫 ■成 果 報 告 不同後熟特性之番石榴果實ACC合 成酶 基因 之選 殖與分析 CloningandCharacterizationofACCSynthaseGenesfromDifferent Ripeing-behaviourGuavaFruits 計畫類別 ：■個別型計畫 □整合型計畫 計畫編號 ：NSC 95 －2313－B－002－068 執行期間 ： 95年 8月 1日至 96年 7月 31日 計畫主持人 ：吳俊達 共同主持人： 計畫參與人員 ：陳國恩 成果報告類型(依經費核定清單規定繳交 )： ■精簡報告 □完整報告 本成果報告包括以下應繳交之附件： □赴國外出差或研習心得報告一份 □赴大陸地區出差或研習心得報告一份 □出席國際學術會議心得報告及發表之論文各一份 □國際合作研究計畫國外研究報告書一份 處理方式 ：除產學合作研究計畫 、提升產業技術及人才培育研究計畫 、列管 計畫及下列情形者外 ，得立即公開查詢 □ 涉及專利或其他智慧財產權，□一年□二年後可公開查詢 執行單位 ：台灣大學 園藝學系 中 華 民 國 96 年 10 月 31 日 1 中文摘要 利用 RT-PCR 基因選殖策略 ，自番石榴果實 （Psidiumguajava L.）選殖出 兩個cDNA片段 ，核苷酸 長度分別為 1576鹼基對 、解碼 435個胺基酸 ，與 977 個鹼基對 、解碼 326個胺基酸 。由 核苷酸 定序結果與基因庫序列比對顯示 ，這兩 個 cDNA選殖系皆 具有ACC合 成酶 （ACCsynthase,ACS）應有的七個胺基酸保守 區域 ，尤其ACS酵素 活性區域 （第五保守區域 SLSKDMGLPGFR）更呈現高度相同 性，推測極可能是番石榴 ACS基因無誤，分別命名為 Pg-ACS1與Pg-ACS2。以專 一性RT-PCR引子 ，分析Pg-ACS1與Pg-ACS2基因在不同發育階段 ‘大蒂’（更 年型）與 ‘珍珠拔’ （非更年型 ）番石榴 表現的情形，Pg-ACS1 mRNA在更年性 ‘大蒂’番石榴發育 到綠熟期與後熟期 才可偵測到明顯的累積 。相反的 ，Pg-ACS2 基因只在 ‘珍珠拔’著果 期有 少量表現。因此 推測 ，Pg-ACS1 基因應隸屬於 乙烯 生合成系統II，Pg-ACS2基因則是 系統I的 ACS。而非更年型 ‘珍珠拔’與更年 型 ‘大蒂’拔番石榴後熟行為的 差異點 應該是前者 無法表現Pg-ACS1 基因因而， 無法在後熟時期 產生大量乙烯所致 。 關鍵字 ： 番石榴 （Psidium guajava L. ）、後熟 、乙烯、ACC合 成酶 Abstract Two cDNA fragments, 1576 bp encoding 435 amino acids and 977 bp encoding 326 amino acids, respectively, were amplified from total mRNA prepared from guava fruit tissues by RT-