8第八单元重组体筛选.pptVIP

蓝白菌落 实验步骤 bp —1534 — 994 — 695 — 515 — 377 — 237 A B C M 5、酶切电泳筛选法 原 理 根据已知的外源DNA序列的限制性酶切图谱，选择一两种内切酶切割质粒，电泳后比较电泳结果（DNA带数和长度） 用合适的内切酶切下插入片断，再用其它酶切这个片断，电泳后比较结果。 A B A或B 不同克隆的酶切结果 筛选过程 第二节 免疫化学与核酸分析法 利用抗体作为“探针”来检测转入受体菌并且表达出相应的蛋白质的外源基因。 根据第一抗体（一抗）和第二抗体（二抗）的性质可分为几种作用方式： 一、放射性抗体检测法 1. 抗体与产物的结合方式 对表达产物的检测。蛋白——蛋白“杂交” 待测基因 产物蛋白 一抗 二抗 125I 标记的二 抗结合蛋白 固相支持滤膜 待测基因 产物蛋白 一抗 125I标记的二抗 固相支持滤膜 待测基因 产物蛋白 一抗 固相支持滤膜 固相支持滤膜 待测基因 产物蛋白 一抗 二抗 125I 标记的二抗 结合蛋白 125I标记的二抗 * * 第八章 重组体的筛选检测 一、核酸分子的遗传学与物理检测法 二、免疫化学与核酸序列分析法 将目的DNA片段与载体连接形成重组子，然后通