中药防治脑出血实验研究与研讨进展.ppt

中药防治脑出血的实验研究进展 ;第一部分 实验性脑出血动物模型;;在立体定位下用微量注射泵向200～300 g的Sprague-Dawley大鼠尾状核注入含0.5 U 胶原酶（Ⅶ型）的生理盐水2 μl，诱导大鼠脑出血。 原理：胶原酶是一种金属蛋白酶，能够分解细胞间基质和血管基底膜上的胶原蛋白。脑内注入胶原酶后20 min即可损伤脑血管基底膜上的胶原蛋白，破坏血脑屏障。血管壁受损后引起渗血，血液逐渐积聚，约4 h时出血区融合成片状出血。出血区的大小由胶原酶注入量的多少决定。该模型操作简单，所产生的出血大小、形态及部位基本一致，重复性好。但注射胶原酶后，需要一段时间才能产生出血，而且出血区实为一弥漫性渗血区，并非一个完全的血肿。与临床自发性脑出血发病情况不同。 ;脑内直接注入自体动脉血或凝血块是最常用的脑出血模型。20世纪60年代多采用狗、猫、猴等大动物，80年代末以后较多使用大鼠作为实验动物。该方法造成的脑出血模型在一定程度上类似人脑出血的病理过程，而且操作简单，通过立体定向手术可造成各种部位的脑出血。 ; Yang等于1994年在立体定位下将100μl新鲜 未肝素化的自体动脉血注入到250~350g的 Sprague-Dawley大鼠尾壳核内，制成脑出血 模型。 Yang GY, Bets AL, Chenevert TL, et al. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J Neurosurg, 1994, 81 (1): 93-102 ; 首次研究了大鼠脑出血从开始发生到7d时脑含水量、局部脑血流量和血脑屏障通透性改变的时程变化规律，并使用MRI证实尾壳核区血肿及水肿情况，结果发现该模型的脑水肿为血管源性与细胞毒性混合性脑水肿，其形成时程与局灶性脑缺血时脑水肿的时程变化大致相似。其主要的方法改进是：以较低压力（100 mmHg）、缓慢（5 min）注血是控制血肿大小一致的关键。该模型适合于研究脑出血的占位效应、脑水肿及来自血管的活性物质等在脑损伤中的作用。 ;二次注血法制作脑出血模型 预先将一聚乙烯套管在立体定位下置入250～450 g的Sprague-Dawley大鼠尾状核，然后用另一聚乙烯导管抽取动脉血，与脑内留置套管连接后以10 μl/min 速度注入15 μl血液???调整套管针方向后7 min，再次抽取自体动脉血，以相同速度注入另外35 μl血液。结果在脑内形成41.1±10.0 μl大小的血肿。该方法可在大鼠脑内产生可重复性的血肿。 Deinsberger W, Vogel J, Kuschinsky W, et al. Experimental intracerebral hemorrhage: description of a double injection model in rats. Neurol Res, 1996, 18 (10): 475-477 ;Wagner等选择家猪作为实验动物： （1）猪脑体积大，沟回多，白质发育好。且具有健康状态一致、费用较低等优点，是制作脑叶出血的理想动物。 （2）猪脑出血可产生20~30倍于啮齿类的出血量，适合于检查外科手术清除血肿的疗效。 （3）猪等大动物白质体积较大，使血清能够在血肿周围聚积而形成脑水肿，与临床脑出血接近。 ; Wagner等采用6～8 kg猪在全麻、气管插管、呼吸机通气、股动脉插管取血及监测血压、股静脉插管输液及注射药物等条件下，用三通开关分别连接立体定向插到尾状核水平的20号塑料管、插入股动脉的导管以及IVAC压力控制注射泵，从股动脉抽取10 ml自体血后，调节三通开关用泵在超过15 min的时间将1.7 ml血液注入到右侧额叶白质内，制成脑出血模型。;Wagner等指出：实验性猪脑叶出血模型具有显著的人脑出血病理特征：该种组织间水肿类似于人脑出血早期血肿周围出现的CT低密度影和MRT2高信号。该模型适用于对减轻脑水肿形成，防止白质损伤及改善脑出血后脑预后等治疗方法的评价。 Wagner等在该模型上证明脑出血后血凝块的形成过程在产生脑白质与灰质水肿中起重要作用[13]，并发现超早期（4 h）应用组织型纤溶酶原激活物（tPA）溶解血凝块后再行血肿抽吸的方法可快速、容易、较完全地（血肿大小的70 %以上）清除血肿、显著减轻血肿周围的水肿并防止血管源性水肿的发展。 ;3 脑内植入填充物方法制作脑出血模型 原理: 利用立体定向手术在脑内植入一些惰性物质如微气囊或油和石蜡的混合物等来模拟脑出血的占位效应