支原体的试验室检测.pdfVIP

支原体的实验室检测 • 广西医科大学第三附属医院 南宁市第二人民医院 梁秀云 一、支原体的病原学 ◆病原学(发现) 支原体（ mycoplasma）在 1898年发现，是一 类大小介于病毒与 细菌之间，能在无 生命的培养基中生 长和增殖的最小原 核微生物。 2 ◆病原学（形态与结构） 大小为0.2～0.3um ， 可通过滤菌器，无细胞壁 ，不能维持固定的形态而 呈现多形性。革兰氏染色 不易着色，故常用Giemsa 染色法将其染成淡紫色。 细胞膜中胆固醇含量较多 ，约占36% ，故凡能作用 于胆固醇的物质（如二性 霉素B、皂素等）均可引 起支原体膜的破坏而使支 原体死亡。 3 ◆病原学（抵抗力） ※ 支原体对热的抵抗力差，通常55℃约15 分钟处理可使之灭活。 ※ 对环境渗透压敏感，渗透压的突变可致 细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和 一些表面活性剂较细菌敏感，但对醋酸铊、 结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。 4 ◆病原学（抵抗力） ※ 对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏 感，但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等 作用于支原体核蛋白体的抗生素，可抑制或 影响蛋白质合成，有杀灭支原体的作用。 5 二、支原体的分类 支原体广泛分布于自然界，有150余种，从 人体分离出16种支原体，其中从人体泌尿生殖道 可分离出7种支原体，与泌尿生殖道疾病密切相 关有： • 人型支原体（M.humenis，MH） • 解脲支原体（Ureaplasma urealyticum, UU ） • 生殖器支原体（M.genitalium，MG） • 微小脲原体（UP）多呈共生状态 6 三、支原体的致病性 • 1 ）尿道炎和黏液脓性宫颈炎 • 2 ）附睾炎和前列腺炎 • 3 ）细菌性阴道病 • 4 ）不育和不孕 • 5 ）盆腔炎 • 6 ）其他 7 四、支原体的实验室检测方法 • 培养法 用于Uu、Mh和Mg的检测，但Mg需培 养数周，分离培养极为困难; • 核酸检测法 PCR法主要用于Uu和Mh的检测 8 ◇标本的采集 • 尿道拭子 • 宫颈拭子 • 前列腺液 • 尿液 9 ◇生殖道支原体感染的实验室检测 1、解脲脲原体的实验室检测 ☆液体培养法： 原理：分解尿素产氨，PH升高，酚红指示剂变红色。 方法：标本接种后，37℃，5%~10%CO2 ，60~80% 湿度环境中为最佳生长条件，孵育3~5天。要求每天 观察结果。 结果：液体培养基变红色且透明清亮为阳性。 注意事项： 标本采集后尽快接种，不能让拭子干燥； 如不能立刻接种，应放入运送培养基并低温保存； 观察结果时应注意有无混浊，如有则应过滤后再接 种观察 10 ☆固体培养法 ： 原理：根据菌落特征鉴定，此法为“金 标准”方法： 方法：先接种液体培养基，然后变红后 马上接种固体培养基观察3至5天。 结果：特征性的油煎蛋样菌落为阳性： 注意事项：在液体培养基微红至粉红时 转种最佳