医学课件第一章节讲_血液标本采集与血涂片制备.pptVIP

b. 蛋白质的化学性质：蛋白质中的氨基酸含有不同 数量的氨基（-NH2）和羧基（-COOH），同时还有其 它活性基团。在游离状态时， -NH2获得一个H+变成 带正电的-NH3+，而-COOH失去一个H+变成带负电的-COO-。分别与不同染料结合。 c. 周围环境的酸碱度：如环境pH＜pI（ pI 为等电 点），则蛋白质带正电，结合酸性染料；反之， pH＞pI，则结合碱性染料。 细胞染色法的类型 普通染色法： 经物理和/或化学作用的吸附、结合 荧光染色法：荧光染料，荧光显微镜 细胞活体染色法：活体染料如灿烂甲酚蓝等 细胞化学染色法：用化学反应显示细胞内某种成分 细胞免疫化学染色法（应用单克隆抗体技术、酶标记技术） 瑞氏染色法 [瑞氏染料] 由酸性染料伊红（eosin,E-）和碱性染料亚甲蓝(methylene blue,M+)组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐，即氯化美蓝。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。伊红通常为钠盐。将伊红和美蓝溶解在甲醇中，即瑞氏染料。   [染色原理] 细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。因此，用本染料液染色后，在同一血片上，可以看到各种不同的色彩，例如血红蛋白，嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。 M+CL + Na+E → ME + NaCL 美蓝 伊红 伊红化美蓝（瑞氏染料） 图1-4 瑞氏染色原理示意图 临床检验基础血液一般检验 主讲人：宫爱华（大连医科大学附属二院检验科） 联系电话 第一章 血液标本采集和血涂片制备 重点：血标本采集方法和血涂片制备技术 难点：各种抗凝剂的优缺点和使用选择 第一节 血液标本采集和抗凝剂选择 血标本： 全血：血细胞+血浆;临床血液学检查，血细胞计数、分类和形态 学检查 血浆：全血除去血细胞；血浆病理性和生理性化学成分的测定，内分泌激素、凝血因子（钙除外）、血栓和止血检查 血清：离体后血液自然凝固后析出的液体成分（除纤维蛋白原等凝血因子）；临床化学和临床免疫学检查 一、采血方法 静脉采血法 部位：主要是肘静脉。还可以在：手背、内踝、股静脉，幼儿可采用颈外静脉采血 采血器材：一次性注射器 采血步骤和注意事项：止血带压迫时间不能过长；注射器和容器必须干燥 采血步骤 选择适宜静脉，在臂扎上压脉带，于穿刺处皮肤做环形消毒 让病人握拳，使静脉显露。左手拇指固定穿刺部位下端，右手持注射器，使针筒刻度向上，先以约30o角度沿静脉正面进针，穿过皮肤刺人静脉腔。 见回血后，右手固定注射器，用左手缓缓抽出注射器针栓，至所需血量后，解除压脉带，放松拳头，以消毒棉签压住穿刺孔，拔出针头 部位：中指或无名指尖内侧、耳垂；半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定 所用器材：采血针、吸管 采血步骤及注意事项：避免交叉应严格实行一人一针制；穿刺的深度的适当，切忌用力挤压，以免混入组织液，影响检验结果。 皮肤采血法（毛细血管采血法） 部位：主要是肘静脉。 采血器材：真空采血装置，头套式、头皮静脉式两种 真空采血法（负压采血法） 方法学评价 静脉采血 皮肤采血 真空采血 缺点 不同抗凝剂的使用， 限制了重复实验； 价格高 改变血液性质，影 易于溶血、凝血 响有形成分的形态; 和可混入组织液 环境污染 优点 标本代表性大，无 价廉、快速、操作 减少溶血，操 组织液影响，适于 简便，标本可直接 作规范，防止 临床研究，可重复 测定 交叉感染，保 实验和追加其他实 护环境 验 质量控制 患者：活动情况、精神状态、