医学课件第三章液相色谱-质谱联用技术技巧课件.pptVIP

建 议 采用等度洗脱 采用甲醇作为流动相 比例偏大 采用小内径的色谱柱 如2.1mm 除MRM模式 不能超过4个通道 一个色谱峰的数据点在15-25个 建 议 ESI广泛适用 APCI效果更佳 正模式广泛适用 负模式本底更低，信噪比更高 影响分子量测定的因素 1）pH的影响：正离子方式pH要低些，负离子方式pH要高些，除对离子化有影响，还影响LC的峰形。 2）气流和温度：水含量高及流量大时要相应增加。 3）溶剂和缓冲液流量：流速适当高可以提高出峰的灵敏度。 4）溶剂和缓冲液的类型：通常正离子用甲醇好，负离子乙腈好些 5）选择合适的液相色谱类型：正相、反相、选择合适的色谱柱 6）合适的电压：DP电压高时，样品在源内分解或碎裂；高DP电压时会使多电荷离子比例低，多聚体也减少 7）样品结构和性质 8）杂质的影响：溶剂的纯度、水的纯净程度等。当成分复杂，杂质太多时，竞争使被测物离子化不好，同时使LC分离不好 9）样品浓度 分子量测定中的误判 溶剂中的杂质 来自于塑料添加剂的峰 样品容器不干净，常见表面活性剂的峰 进样系统污染 样品在源内碎裂，形成碎片离子 分子量测定失败的原因 a）流动相不合适 b）不挥发性盐的影响 c）成分复杂，杂质太多 d) 样品浓度不够 e）pH值不合适 f）样品在源内分解或碎裂 目标