肺癌个体化检测及质控演示教学.pptVIP

EGFR基因突变检测方法的选择 DNA 测序在部分地区仍然是EGFR 检测的金标准 其他方法，比如ARMS可能比直接测序更敏感，目前已被广泛应用 新的EGFR基因检测方法层出不穷，其检验效能有待进一步考证 优化检测途径，最大限度提高检测敏感性、降低假阳性 和假阴性率以获得可靠的检测结果对每个患者来说都至关重要 克唑替尼: 概述 名称: PF通用名: 克唑替尼 商品名: XALKORITM 化学式: C21H22Cl2FN5O 作用机制: 竞争性ATP 抑制剂 主要靶点: ALK、c-Met、ROS 2011年8月26日美国FDA批准用于ALK阳性非小细胞肺癌 克唑替尼在ALK ATP结合部位 Pfizer, data on file ROS1基因重排 ROS1的重排成为了一种继成功发现肺癌突变基因KRAS（占25%）、EGFR（占10-15%）、ALK（占4%）后，再一次发现最新的肺癌基因突变ROS1。ROS1基因突变的癌症患者常见于年龄偏小，不吸烟，病理类型为腺癌的肺癌。由ROS1基因重新排列引起的癌症在非小细胞肺癌中占1%。ROS1重排可引起癌基因ROS1融合激酶的表达及对ROS激酶抑制剂敏感性。Crizotinib作为C-MET、ALK及ROS的小分子酪氨酸激酶抑制剂可能成为进展期非小细胞肺癌有效治疗药物。该药物已经获准用于局部进展期和转移性ALK阳性的非小细胞肺癌患者的治疗。 分子靶向基因检测质量问题 实验室： 达标 人员资质标准化 检测人员上岗培训、上岗证书 报告签发人员资质、分子病理医师 实验条件；检测方法：方法越是灵敏，抗污染的问题越是突出 标本来源：不同的标本，应相对采用不同的检测方法 分子病理实验室质量要求 二. PCR实验室要达标，通过国家验证 检测结果要做室间比对 国际间的室间比对 ( EMQN, ESP, ETOP and ESMO) 分子病理实验室要通过ISO15189认可 临床标本与研究标本的差异 标本类型 肿瘤细胞 含量 标本处理 其他分析前、分析后 处理 实际临床标本 新鲜组织、蜡块、穿刺组织、脱落细胞等 随意性大，无严格要求 固定方式、试剂、标本离体时间各异 不定 研究标本 统一要求 要求统一，被病理所确认 统一的保存以及运送条件 尽量统一 分子检测与靶向治疗的关键步骤 根据结果制定治疗方案 临床采集合适的组织标本 选择合适的 检测方法 1 2 3 分子检测与靶向治疗的关键步骤 根据结果制定治疗方案 临床采集合适的组织标本 选择合适的 检测方法 1 2 3 标本来源 手术切除标本 气管镜活检标本 经皮穿刺标本 淋巴结穿刺标本 胸水/心包 细胞学标本 血清DNA标本及循环细胞 标本相关问题 标本异质性 标本类型 标本的收集和储存 标本是获得高质量检测结果的重要前提 常用标本获取方法 CT引导下肺穿刺活检 模拟气管镜引导下经支气管镜肺组织活检(VB-TBLB) 经气管镜超声引导下活检 (EBUS) 锁骨上淋巴结穿刺活检 胸腔闭式引流术 心包穿刺术 外科开胸手术活检 胸腔镜活检 纵隔镜活检 微创手术活检 取样中存在的问题 肿瘤的位置 肿瘤生长的部位有时难以进行内科穿刺活检，需要依靠外科手术活检取材 细针穿刺时使用的器材尺寸可能影响细胞的获取量及DNA的质量 由于无法保证每次都能取得足够的标本，需要一些适用于小标本的检测方法 肿瘤标本获取的主要途径 手术(切除/切取) 支气管镜 (活检：中央型) 穿刺 (活检：周围型) 制备蜡块 切片 HE染色 确认癌细胞 以临床医生认为最容易获取的方式 原发病灶 / 转移灶肿瘤组织 胸水等 标本的获取 标本的获取：以穿刺为例 可行性评估 根据病灶位置选择合适的穿刺手段 复杂情况的处理 严重水肿 基底部位呼吸动度较大部位的肿块 肿块内部支气管充气征明显 肿瘤内血管丰富 基底部位呼吸动 度较大部位的肿块 肿瘤内血管丰富 严重水肿 肿块内部 支气管充气征明显 标本的获取 对周围型病变，TBLB创伤小，可重复性强，是一种相对安全有效的检查方法，但TBLB取材大小受器械规格限制，活检组织易受挤压变形而影响检测结果1 锁骨上淋巴结穿刺活检是一种便捷有效的临床技术，检出率高，副反应小2，但仅能提供细胞学样本。 EBUS可通过中央气道取的组织，诊断迅速，并发症少，是一种安全性较好的活检方法。对肺癌和其他纵膈恶性疾病诊断价值高，并可协助分期3 胸腔闭式引流术和心包穿刺术并发症少，容易为患者接受，术前需行超声定位，可在超声引导或CT引导下进行4,5 。但引流获得标本需进一步富集。 外科方法可获取大量、新鲜样本，但创伤较大