项目一血液标本采集与血涂片制备教学讲义.pptVIP

;医学检验;临床检验基础又称为实验诊断学，是通过实验室的各种检查方法，包括感官检查、理学检查、化学检查、显微镜检查以及自动化仪器检查，对离体的血液、体液、分泌物和排泄物、脱落细胞等标本进行化学、病原生物学、显微镜形态学的检查、分析，以获得有关病原、病理生理变化及脏器功能状态等实验资料，从而协助临床对疾病进行筛检、诊断和鉴别诊断。;自动化仪器检查:电子计算机技术、自动化检验仪器取代手工法。速度快、精度高、操作易、参数多、易质控、信息大等。;临床检验工作流程与质量控制;临床检验在医学中的应用;绪 论;重点：1.血标本采集方法和血涂片制备技术 2.抗凝剂的应用 难点：血细胞染色原理; 血 液 组 成;概述;概述;任务一 血液标本的采集及抗凝;一、采血部位;毛细血管采血法;按摩：轻轻按摩采血部位，使其自然充血。 消毒：用75%乙醇消毒棉球消毒。 ;四、注意事项;毛细血管采血法;1.毛细血管采血时应注意些什么？ 2.选择题： 1）新生儿做血细胞计数，多用下列哪个部位采血 A.手背 B.耳垂 C.足跟 D.左手无名指 2）关于毛细血管采血法，下列正确的是 A.耳垂血的红细胞、白细胞、血细胞比容结果 均比静脉血低10%左右 B.手指采血时流出的第一滴血即可用于检查 C.婴儿宜用耳垂或手指采血 D.成人推荐用手指采血，因其检查结果比较恒定;一、采血部位;四、注意事项;;血液标本的采集;血液标本的采集;抗凝：用物理或化学的方法，去除或抑制某些凝血因子，阻止血液凝固。;常用抗凝剂：枸橼酸钠、草酸钠、二草酸盐、乙二胺四乙酸二钠（EDTA)、肝素;一.枸橼酸钠（柠檬酸钠）;二.草酸钠;四.乙二胺四乙酸（EDTA）盐;五.肝素;临床常用的采血试管;1.毛细血管采血时应注意些什么？ 2.常用的血液抗凝剂有哪些？ 3.选择题： 1）新生儿做血细胞计数，多用下列哪个部位采血 A.手背 B.耳垂 C.足跟 D.左手无名指 2）关于毛细血管采血法，下列正确的是 A.耳垂血的红细胞、白细胞、血细胞比容结果 均比静脉血低10%左右 B.手指采血时流出的第一滴血即可用于检查 C.婴儿宜用耳垂或手指采血 ;? 3）不与Ca2+作用,但能阻止血液凝固的抗凝剂是 A.草酸盐 B.EDTA-K2 C.肝素 D.枸橼酸钠 4）下列几种抗凝剂，哪种最适宜用于血细胞计数 A. 乙二胺四乙酸二钾(EDTA－K2) B.枸橼酸钠 C.草酸钠 D.草酸钾? 5）肝素作为抗凝剂,下列叙述错误的是 A.具有较强的抗凝能力 B.不影响血细胞体积 C.过量使用可引起白细胞聚集 D.适用于做白细胞分类计数;; 血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值，近年来血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。 血涂片的用途：血细胞形态学检验、网织红、 寄生虫检验。 ; 一、手工推片法;;;血涂片的观察;适宜; 二、血液涂片染色 ;瑞氏染料的组成：由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料溶于甲醇制备而成。 碱性染料：为阳离子染料，能接受质子，细胞核的染料。如亚甲蓝、天青。能结合酸性物质并染色，如淋巴细胞及嗜碱性粒细胞染成蓝色 酸性染料：为阴离子染料，能释放质子。如伊红。能结合细胞的碱性成分并染色，如血红蛋白、嗜酸性颗粒成分等染成红色。; 细胞染色原理：;b. 蛋白质的化学性质：蛋白质中的氨基酸含有不同 数量的氨基（-NH2）和羧基（-COOH），同时还有其 它活性基团。在游离状态时， -NH2获得一个H+变成 带正电的-NH3+，而-COOH失去一个H+变成带负电的-COO-。分别与不同染料结合。 c. 周围环境的酸碱度：如环境pH＜pI，则蛋白质带正电，结合酸性染料；反之，pH＞pI，则结合碱性染料。 ; 细胞染色法的类型; 瑞氏染色法;[染色原理]; 例如血红蛋白，嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。 M+Cl + Na+E → ME + NaCl 美蓝 伊红 伊红化美蓝（瑞氏染料） ;; [试剂]; [染色方法]; 【质量控制】; 中性杆状核粒细胞; 嗜酸性粒细胞; 嗜碱性粒细胞;姬姆萨染色法;吉姆萨染料 1.0g